Question

【題目】凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶。直接利用動(dòng)、植物生產(chǎn)凝乳酶受多種因素限制，培育高酶活力凝乳酶微生物菌種是目前最有前途的發(fā)展方向。用紫外線照射芽孢桿菌，分離、培養(yǎng)，并檢測(cè)各菌株所產(chǎn)生的凝乳酶活力。操作過(guò)程如圖1所示。請(qǐng)分析回答：

（1）圖1所示的b過(guò)程的目的是為獲得______，接種用的平板培養(yǎng)基______（是/不是）選擇培養(yǎng)基。

（2）在一定溫度下（35℃），一定時(shí)間內(nèi)（通常為40分鐘），凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。凝乳酶活力檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。

①據(jù)圖2所示，酶催化能力最強(qiáng)的是______組。

②A2、A5組酶活力與A0組芽孢桿菌相同，兩位同學(xué)對(duì)此做出了推測(cè)：

同學(xué)甲：A2、A5組芽孢桿菌未發(fā)生基因突變，而其他組發(fā)生的變化說(shuō)明基因突變具有___________的特點(diǎn)。

同學(xué)乙：A2、A5組芽孢桿菌發(fā)生基因突變，但凝乳酶蛋白未改變，其依據(jù)的理由是______。

（3）從牛胃液中分離到的凝乳酶以催化能力強(qiáng)而被廣泛應(yīng)用，研究人員運(yùn)用基因工程技術(shù)，將編碼該酶的基因轉(zhuǎn)移到了微生物細(xì)胞中。構(gòu)建重組DNA分子（如圖3所示）最好選用______限制酶。

Answer 1

【答案】 單個(gè)菌落 不是 A6 不定向 一種氨基酸可能對(duì)應(yīng)多種密碼子 BamHI和PstI

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，圖1所示的b過(guò)程為菌落的稀釋?zhuān)�培養(yǎng)基中含有多種酶活力不同的突變芽孢桿菌；圖2中，凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是6組；由圖3可知，質(zhì)粒和外源DNA中共同含有且不會(huì)破壞目的基因的限制酶是BamHI和PstI。

（1）圖1所示的b過(guò)程為菌落的稀釋?zhuān)�目的是為獲得單個(gè)菌落；由圖可知培養(yǎng)基中含有多種酶活力不同的突變芽孢桿菌，故接種用的平板培養(yǎng)基不是選擇培養(yǎng)基。

（2）①據(jù)圖2所示，凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是A6組，故酶催化能力最強(qiáng)的是A6組。

②同學(xué)甲：基因突變有低頻性的特點(diǎn)，故很可能使A2、A5組的細(xì)菌均未發(fā)生基因突變；同學(xué)乙：如果A2、A5組芽孢桿菌發(fā)生基因突變，但凝乳酶蛋白未改變，這可能是因?yàn)橐环N氨基酸可能對(duì)應(yīng)多種密碼子，隨基因發(fā)生突變，但不會(huì)改變翻譯出來(lái)的氨基酸；也可能是因?yàn)榘l(fā)生基因突變的區(qū)段為非編碼區(qū)。

（3）由圖3可知，質(zhì)粒和外源DNA中共同含有且不會(huì)破壞目的基因的限制酶是BamHI和PstI，因此構(gòu)建重組DNA分子最好選用BamHI和PstI限制酶，這樣可以防止自身的黏性末端連接，也可以防止目的基因與載體反向連接。