Question

13．硅酸鹽細菌可以將土壤中不溶性的含鉀礦物（如長石、云母）以及磷灰石等分解轉(zhuǎn)化，釋放出水溶性的鉀、磷，將土壤中的無效磷鉀轉(zhuǎn)化為速效養(yǎng)分．現(xiàn)代工業(yè)可將硅酸鹽細菌制成肥料，達到增產(chǎn)目的．硅酸鹽細菌在無氮培養(yǎng)基、鉀細菌培養(yǎng)基以及硅酸鹽細菌培養(yǎng)基上均能生長．請回答下列問題：
（1）在微生物培養(yǎng)過程中，為了防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌；在倒平板時，應(yīng)在酒精燈火焰附近進行操作．
（2）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長，最可能的原因是接種環(huán)溫度過高，細菌均被殺死．
（3）采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計硅酸鹽細菌活菌的個數(shù)，要使得到的估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣本稀釋的比例合適．如表是每種培養(yǎng)基上每個稀釋度的平均菌落數(shù)及菌落直徑的情況．

培養(yǎng)基種類	各稀釋度對應(yīng)的平均菌落數(shù)				菌落直徑（mm）
	103	104	105	106
無氮培養(yǎng)基	32	3	2	0	1.0～2.0
鉀細菌培養(yǎng)基	36	6	4	0.6	多數(shù)小于1.5
硅酸鹽細菌培養(yǎng)基	50	8	5	1.2	多數(shù)大于2.0

根據(jù)表格分析可知，該實驗的自變量是培養(yǎng)基的種類及細菌的稀釋度．根據(jù)實驗結(jié)果分析，采用硅酸鹽細菌培養(yǎng)基篩選硅酸鹽細菌的效果最好．對分離的硅酸鹽細菌進行計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少．
（4）若在進行上述實驗的同時不設(shè)置空白對照，則不能確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底．

Answer 1

分析 微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）在微生物培養(yǎng)過程中，為防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌．在倒平板時，應(yīng)在酒精燈火焰附近進行操作．
（2）由于該接種過程中的3塊平板相同，菌種來源相同，只有一塊平板接種培養(yǎng)后無菌落生長，對比可知，問題應(yīng)出現(xiàn)在接種過程中，最可能的原因是接種環(huán)溫度過高，細菌均被殺死．
（3）采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計硅酸鹽細菌活菌的個數(shù)，要使得到的估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣本稀釋的比例合適．根據(jù)表格中的數(shù)據(jù)可知，自變量為培養(yǎng)基種類及細菌的稀釋度，因變量為平均菌落數(shù)及菌落直徑．根據(jù)實驗結(jié)果可知，在硅酸鹽細菌培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，平均菌落數(shù)最多，菌落直徑最大，說明采用硅酸鹽細菌培養(yǎng)基篩選硅酸鹽細菌的效果最好．由于兩個或者多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少．
（4）若不設(shè)置空白對照，則不能確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底．
故答案為：
（1）防止雜菌污染酒精燈火焰
（2）接種環(huán)溫度過高，細菌均被殺死
（3）比例合適    培養(yǎng)基的種類及細菌的稀釋度    硅酸鹽細菌     少
（4）培養(yǎng)基滅菌是否徹底

點評 本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強化學生對實驗室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識的理解與掌握．