Question

13．近期，思念、三全、灣仔碼頭等企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品相繼檢出金黃色葡萄球菌超標(biāo)，“細(xì)菌門”事件引起公眾的普遍關(guān)注．請回答下列問題：
（1）某小組欲檢測果汁類食品中是否含有金黃色葡萄球菌．經(jīng)查資料：葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)．請完成下列實驗步驟：
①配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)pH，分裝到錐形瓶后滅菌，在無菌狀態(tài)下加入卵黃液（100mL10%滅菌NaCl溶液中加一個雞蛋黃，振蕩均勻）搖勻，立即倒平板．
②接種：取待檢果汁2.5mL加入到22.5mL的滅菌生理鹽水中，制成接種樣液．
實驗組：將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上．
對照組：將滅菌生理鹽水用同樣的方法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作空白對照．
將上述接種后的培養(yǎng)皿同時放在36℃的恒溫箱中培養(yǎng)48h
③觀察：觀察培養(yǎng)基表面是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落
（2）葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl，所以在配制培養(yǎng)基時加入高濃度的NaCl可以將它分離出來．此培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）要統(tǒng)計每克果汁樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據(jù)果汁樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目就能大約推測出樣品中活菌數(shù)．

Answer 1

分析 微生物的分離
①利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質(zhì)的“嗜好”，專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì)，使該微生物大量增殖．這些物質(zhì)主要是一些特殊的碳源、氮源，如纖維素可用來富集纖維素分解微生物，尿素可用來富集尿素分解微生物．
②利用該分離對象對某種抑制物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，由于原來占優(yōu)勢的它種微生物的生長受到抑制，而分離對象卻可趁機(jī)大量增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢．如篩選酵母菌和霉菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素，因青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的細(xì)胞壁的合成，從而抑制兩類微生物的生長，而酵母菌和霉菌正常生長增殖．

解答 解：（1）①配制培養(yǎng)基的過程是計算、稱量、熔化、滅菌、倒平板．熔化后滅菌前要調(diào)節(jié)PH．
②由題干知實驗?zāi)康氖�，欲檢測果汁類食品中是否含有金黃色葡萄球菌，實驗分兩組，一個實驗組，將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上，另一組作為對照，將滅菌生理鹽水用同樣的方法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作空白對照．
③由題干知原理是葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)，所以觀察的指標(biāo)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落．
（2）配制培養(yǎng)基時加入高濃度的NaCl，只有能耐受高濃度NaCl的葡萄球菌能生長繁殖，不能耐受高濃度NaCl的微生物不能生長繁殖，所以屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）統(tǒng)計每克果汁樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據(jù)果汁樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目 就能大約推測出樣品中活菌數(shù)．
故答案應(yīng)為：
（1）①pH   滅菌    ②平板劃線   滅菌生理鹽水     ③是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落
（2）選擇
（3）稀釋涂布平板    菌落數(shù)目

點評 本題是以“細(xì)菌門”事件為背景考查微生物的分離與培養(yǎng)，主要考查學(xué)生運(yùn)用所學(xué)的知識解決實際問題的能力．