Question

【題目】將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。回答下列問題：

（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制___________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。

（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質，營養(yǎng)物質類型除氮源外還有______________（答出兩點即可）。氮源進入細菌后，可參與合成的生物大分子有____________________（答出兩點即可）。

（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產生淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是______________。挑選出能產生_______________的菌落即為產生淀粉酶的微生物，該方法可以篩選出產生淀粉酶的微生物的原理是________________________________________________________。

（4）甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數量，在同一稀釋倍數下得到以下結果：

甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是110、140和149，取平均值133。

乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是27、169和176，取平均值124。

有人認為這兩位同學的結果中，乙同學的結果可信度低，其原因是：_____________。

Answer 1

【答案】細菌 選擇 碳源、無機鹽 蛋白質、DNA、RNA 碘液 透明圈 淀粉遇碘顯藍色，產淀粉酶菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈 乙同學的結果中，1個平板的計數與另2個相差懸殊，結果的重復性差（或一致性差）

【解析】

1、從混合樣品中獲得某種微生物的方法通常有兩種：

（1）可利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質有一“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入或不加該營養(yǎng)物質，從而使它成為一種選擇培養(yǎng)基（如在含高濃度NaCl的培養(yǎng)基上分離金黃色葡萄糖球菌，在不含N的培養(yǎng)基上分離圓褐固氮菌）；或根據分離對象對pH、溫度和氧氣濃度的喜好，改變培養(yǎng)環(huán)境的理化性質，使環(huán)境條件最適宜該微生物的生存，從而達到分離的目的。

（2）可利用該分離對象對某種抑菌物質的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物，經培養(yǎng)后，原來占優(yōu)勢的微生物生長受抑制，而分離對象卻可乘機大大增殖，使之在數量上占優(yōu)勢（如在加入青霉素的培養(yǎng)基上分離真核微生物）。

2、培養(yǎng)基的成分：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。

3、微生物培養(yǎng)的計數過程中，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。

（1）M培養(yǎng)基著用于真菌的篩選，抗生素能夠殺菌，因此培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制細菌的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質，包括水、無機鹽、碳源、氮源等。生物大分子包括蛋白質、核酸、多糖，由于糖類的元素組成中只有C、H、O，因此氮源進入細胞后可參與蛋白質、核酸等的合成。

（3）淀粉遇碘液變藍色，要篩選出能產淀粉酶的微生物可在培養(yǎng)基中加入碘液，該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是淀粉遇碘液顯藍色，產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈。

（4）乙同學的結果中，1個平板的計數結果與另2個相差懸殊，結果的重復性差，因此其可信度差。