Question

3．①為了獲得能合成纖維素酶的單菌落，可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法將初篩菌液接種在固體（固體/液體）培養(yǎng)基上，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
②關(guān)于制備固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是D．
A．制作固體培養(yǎng)基時(shí)可以加入瓊脂  B．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置
C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板D．順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌
③下表的培養(yǎng)液pH均為4.8，若對(duì)MC-1中纖維素酶的活力進(jìn)行測(cè)定，則不能選擇表中的哪幾種培養(yǎng)液A、B、C？（填字母）

培養(yǎng)液	纖維素	纖維素酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgSO4•7H2O	FeSO4
A	25g/L	-	-	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
B	-	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
C	25g/L	1μg/L	-	3g/L	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
D	25g/L	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L

④某同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌．若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

解答 解：①純化微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種在固體培養(yǎng)基上；為了獲得能合成纖維素酶的菌株MC-1，應(yīng)該用選擇培養(yǎng)基．
②A．制作固體培養(yǎng)基時(shí)可以加入凝固劑--瓊脂，A正確；
B．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置，B正確；
C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板，C正確；
D．操作的順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，D錯(cuò)誤．
故選：D．
③分析題干信息可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是菌株MC-1中纖維素酶的活力，因此所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基，且培養(yǎng)基的基本成分應(yīng)包括碳源，氮源、水和無(wú)機(jī)鹽，分析性表格中的培養(yǎng)基的成分可知，A培養(yǎng)基缺乏氮源，微生物不能生長(zhǎng)；B沒(méi)有碳源，微生物應(yīng)為無(wú)法生長(zhǎng)，C不是以纖維素為唯一碳源，牛肉膏也可以作為碳源，因此A、B、C不能用于對(duì)MC-1中纖維素酶的活力進(jìn)行測(cè)定的培養(yǎng)基．
④在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料，培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌．
故答案為：
①平板劃線法或稀釋涂布平板    固體     選擇
②D  
③A、B、C    
④酚紅 剛果紅

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記分離微生物的兩種常用方法，識(shí)記培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)基的分類，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．