Question

【題目】多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲劑等生產(chǎn)過程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見的污染物之一。下圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲的菌株Q的主要步驟。請(qǐng)回答：

（1）步驟①→③的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中加人多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，目的是__________。

（2）步驟①→③的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能___________________。

（3）采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)的目的是_____________。

（4）接種環(huán)通過灼燒來滅菌，完成步驟④中劃線操作，共需灼燒接種環(huán)__________次；平板劃線法不能用于微生物的活菌計(jì)數(shù)，其原因是_________________。

（5）為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強(qiáng)的菌株，研究人員又對(duì)菌種Q進(jìn)行了誘變處理，得到突變株K。為了比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，設(shè)計(jì)了下列實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)補(bǔ)全實(shí)驗(yàn)步驟：

①取9只錐形瓶均分成三組，編號(hào)A、B、C。

②向9支錐形瓶中分別加入_________的培養(yǎng)液。

③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入__________________。

④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測(cè)定錐形瓶中________________。

Answer 1

【答案】篩選出菌株Q 增加培養(yǎng)液中的溶氧量 防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基 6 平板上形成的菌落只有少數(shù)是單個(gè)菌體形成的單菌落 等量的以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源 等量的無菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液 多環(huán)芳烴菲的降解率(多環(huán)芳烴菲的剩余量)

【解析】

據(jù)圖圖示表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲菌株Q的主要步驟，其中步驟①→③的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，目的是篩選出菌株；該過程還需將錐形瓶放在搖床上振蕩，目的有兩個(gè)，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能增加培養(yǎng)液中的溶氧量；步驟④表示用平板劃線法純化菌株的過程，接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌。

（1）因?yàn)榫��?/span>Q能降解多環(huán)芳烴菲，所以步驟①→③的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，目的是篩選出菌株。

（2）步驟①→③的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能增加培養(yǎng)液中的溶氧量。

（3）采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)的目的是為了防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染。

（4）接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以完成步驟④中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次；稀釋涂布平板法最終在培養(yǎng)基上可獲得由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成的單菌落，根據(jù)稀釋倍數(shù)計(jì)算分析可對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，而平板劃線法接種時(shí)菌液經(jīng)過連續(xù)劃線，由于線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，菌液中的菌體越來越少，最后平板上形成的菌落只有少數(shù)是單個(gè)菌體形成的單菌落，不能用于微生物的活菌計(jì)數(shù)。

（5）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，自變量是菌種不同，即菌株Q和突變株K，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要遵循對(duì)照原則，對(duì)照組需加入等量無菌水，所以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：

①取9只錐形瓶均分成三組，編號(hào)A、B、C；

②向9支錐形瓶中分別加入等量以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源的培養(yǎng)液；

③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入等量的無菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液；

④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測(cè)定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率(多環(huán)芳烴菲的剩余量)。