Question

（10分）通過基因工程的方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉入棉花植株并獲得成功表達。棉鈴蟲吃了這種轉基因棉花的植株后就會死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚體細胞中，借助天然的種胚系統(tǒng)，形成含有目的基因的種胚。請回答下列問題：

（1）下列所示的黏性末端是由________種限制性核酸內切酶作用產生的。

（2）利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞，此過程是基因工程操作步驟中的第三步，即 。獲取目的基因時，如果基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以通過DNA合成儀用化學方法直接 。

（3）該目的基因在導入受體細胞前需要與載體結合，目前經常使用的載體是 。

（4）基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技術是 ；其次還要檢測 ，方法同樣是采用分子雜交技術；最后檢測 ，方法是 ____________________雜交。

Answer 1