Question

13．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常常需要進(jìn)行微生物的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)．請(qǐng)回答下列與微生物的培養(yǎng)和利用有關(guān)的問(wèn)題．
（1）如圖是利用平板劃線法將微生物接種到固定培養(yǎng)基上，把混合的菌種逐步分散獲得單個(gè)菌落．接種后培養(yǎng)基應(yīng)倒置放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．
（2）分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O．若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)篩選尿素分解菌，則應(yīng)除去上述培養(yǎng)基成分中的NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖物質(zhì)，以補(bǔ)充氮、碳源．
（3）三位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量．在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中，取0.2ml稀釋液涂布，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果．
甲同學(xué)涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是260．
乙同學(xué)涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是210和240和246，取平均值232．
丙同學(xué)涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163．
在三位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)中，乙 同學(xué)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果是相對(duì)準(zhǔn)確可信的．按照該同學(xué)的結(jié)果，每毫升原液中的菌體數(shù)是116×10⁷個(gè)．用這種方法測(cè)得的菌體數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)量少，原因是涂布時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落．

Answer 1

分析 1、據(jù)圖分析；圖示接種方法為平板劃線法．微生物的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法．篩選目的微生物應(yīng)該使用選擇培養(yǎng)基．培養(yǎng)基中應(yīng)該有滿足目的微生物生活的碳源、氮源水和無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì)．
2、平板劃線法是接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的造作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，在數(shù)次劃線之后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體-菌落；為了得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落，劃線時(shí)應(yīng)注意：第二次及以后的每次劃線前要灼燒接種環(huán)，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始化，首尾區(qū)的劃線不能相接．

解答 解：（1）右圖是利用平板劃線法將微生物接種到固體培養(yǎng)基上，把混合的菌種逐步稀釋分散獲得單個(gè)菌落．接種后培養(yǎng)基應(yīng)倒置放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．
（2）培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，其氮源是尿素，所以培養(yǎng)基中要除去含氮物質(zhì)，即去除NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源．
（3）在三位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)中，乙同學(xué)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果是相對(duì)準(zhǔn)確可信的．按照該同學(xué)的結(jié)果，每克樣品中的菌落數(shù)=平板上菌落數(shù)的平均值÷體積×稀釋倍數(shù)=233÷0.2×10⁶=1.165×10⁹．當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落，因此用這種方法測(cè)得的菌體數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)量少．
故答案為：
（1）平板劃線      倒置
（2）NaNO₃      尿素和葡萄糖         氮、碳
（3）乙        116×10⁷個(gè)    少   涂布時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、測(cè)定某種微生物的數(shù)量等知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分和微生物的接種方法，并能準(zhǔn)確判斷圖中的接種方法；能采用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和簡(jiǎn)單的計(jì)算．