Question

【題目】右圖為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：

（1）植物細胞工程常用的技術(shù)手段有__________。動物細胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是____________。

（2）若圖中A、B是植物細胞，在細胞融合之前應(yīng)用____________處理，除去________________；A、B到細胞C的過程中，常用的化學(xué)方法是利用____________誘導(dǎo)；融合完成的標志是____________。

（3）與植物細胞相比，動物細胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是_____________。

（4）若利用動物細胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)采用___________和____________兩種細胞進行融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)特異抗體的雜交瘤細胞，第一次篩選一般利用___________進行，第二次篩選需對細胞進行反復(fù)的________________，以篩選出能產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細胞。

（5）少量生產(chǎn)單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細胞注入到小鼠腹腔內(nèi)繁殖，該方法的優(yōu)點是_______。

Answer 1

【答案】（1）植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交 動物細胞培養(yǎng)

（2）纖維素酶、果膠酶 細胞壁 PEG 再生出細胞壁

（3）滅活的病毒

（4）經(jīng)免疫的B細胞 骨髓瘤細胞 選擇培養(yǎng)基 克隆化培養(yǎng)和抗體（陽性）檢驗

（5）節(jié)約培養(yǎng)基（成本），易于控制培養(yǎng)條件等（經(jīng)濟，方便等，合理就給分）

【解析】（1）植物細胞工程常用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交。動物細胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)。

（2）植物體細胞雜交前，先采用酶解法去除細胞壁，即采用纖維素酶、果膠酶處理除去細胞壁；誘導(dǎo)細胞融合常用的化學(xué)方法是PEG誘導(dǎo)；原生質(zhì)體融合完成的標志是再生出細胞壁。

（3）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇），誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）。因此，與植物細胞相比，動物細胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是滅活的病毒。

（4）若利用動物細胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)將經(jīng)免疫的B細胞和骨髓瘤細胞融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)特異抗體的雜交瘤細胞，第一次篩選一般利用選擇培養(yǎng)基進行，第二次篩選需對細胞進行反復(fù)的克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢驗，以篩選出能產(chǎn)特定抗休的雜交瘤細胞。

（5）少量生產(chǎn)單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細胞注入到小鼠腹腔內(nèi)繁殖，該方法的優(yōu)點是節(jié)約培養(yǎng)基（成本），易于控制培養(yǎng)條件等。

項目	細胞融合原理	細胞融合方法	誘導(dǎo)手段	用途
植物體細胞雜交	細胞膜的流動性，（細胞的全能性）	去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合	離心、電刺激、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)	克服遠緣雜交不親和，獲得雜交植株
動物細胞融合	細胞膜的流動性	使細胞分散后，誘導(dǎo)細胞融合	離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導(dǎo)	制備單克隆抗體的技術(shù)之一