Question

已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

　 (1)實驗步驟①所代表的反應過程是________________________________________________________________________。

　 (2)步驟②構(gòu)建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用________________________________________________________________________。

　 (3)如果省略步驟②而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能________，也不能______________。

　 (4)為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特征，可用________與________進行抗原—抗體特異性反應實驗，從而得出結(jié)論。

　 (5)步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是________________________________________________________________________。

 

Answer 1

(1)逆轉(zhuǎn)錄　(2)限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶　(3)復制　合成S基因的mRNA(或轉(zhuǎn)錄)　(4)大腸桿菌中表達的S蛋白　SARS康復病人血清　(5)相同　表達蛋白質(zhì)所用的基因相同

 

本題考查基因工程的工具及操作步驟和學生識圖能力。(1)圖中①RNA→DNA表示通過逆轉(zhuǎn)錄方式獲得目的基因。(2)基因表達載體構(gòu)建時，需要利用限制酶對載體和目的基因進行剪切，形成黏性末端，然后用DNA連接酶將目的基因和載體連接起來，形成重組載體。(3)目的基因?qū)�入受體細胞后，需要借助于載體在受體細胞中進行復制而擴增目的基因，從而獲得大量的表達產(chǎn)物，而直接導入則容易被受體細胞中的DNA水解酶所水解，導致得不到表達產(chǎn)物。(4)S蛋白為SARS病毒表面主要的病毒抗原，因此用抗原—抗體特異性反應實驗可檢測其是否具有同樣的抗原性。(5)步驟④和⑥相比，基因相同，只是導入的受體細胞的種類不同，因為真核生物和原核生物共用一套密碼子，所以表達產(chǎn)物相同。