Question

如圖是將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞，培育轉(zhuǎn)基因動物的常用操作程序．根據(jù)圖示過程和所學(xué)知識，將下面的操作程序補(bǔ)充完整．

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體：如果要使目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，基因表達(dá)載體構(gòu)建時要將目的基因與

 

的啟動子、標(biāo)記基因和

 

等組件重組在一起．
（2）獲得足夠數(shù)量的受精卵：為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供體雌鼠，使其超數(shù)排卵．雌鼠經(jīng)過交配，將受精卵從

 

中取出．
（3）將目的基因?qū)�入�?xì)胞：通常采用

 

將目的基因?qū)�入受精卵�?br />（4）早期胚胎培養(yǎng)：早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、

 

、氨基酸、核苷酸以及動物血清等營養(yǎng)成分．當(dāng)胚胎培養(yǎng)到適宜的階段時，可進(jìn)行胚胎移植．
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要對接受胚胎的受體進(jìn)行同期發(fā)情處理．移植后，還要對受體雌鼠進(jìn)行

 

．
（6）轉(zhuǎn)基因鼠的檢測：經(jīng)過一段時間妊娠后，產(chǎn)下一群小鼠，為了檢測哪些是轉(zhuǎn)基因鼠，可以用

 

制作探針，進(jìn)行

 

檢測．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（1）要使目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，構(gòu)建基因表達(dá)載體時要將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子、標(biāo)記基因和終止子等組件重組在一起．
（2）為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵．雌鼠經(jīng)過交配后，從輸卵管中取出受精卵．
（3）將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞常用顯微注射技術(shù)．
（4）早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及動物血清等物質(zhì)．
（5）胚胎移植后，還要對受體雌鼠進(jìn)行妊娠檢查．
（6）檢測哪些鼠是轉(zhuǎn)基因鼠，可采用DNA分子雜交技術(shù)，即用放射性同位素標(biāo)記的目的基因制作為探針，進(jìn)行DNA分子雜交檢測．
故答案為：
（1）乳腺蛋白基因   終止子   
（2）輸卵管  
（3）顯微注射技術(shù)  
（4）激素     
（5）妊娠檢查 
（6）放射性同位素等標(biāo)記目的基因    DNA分子雜交

點(diǎn)評：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因動物培育流程圖，考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．