Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，目前已成為有效的生物治療手段。

（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)，是因?yàn)镠蛋白在成年個(gè)體的正常組織中_________（填“低表達(dá)”或“高表達(dá)”）。H蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時(shí)，應(yīng)構(gòu)建_________區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。

（2）將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細(xì)胞與_________細(xì)胞進(jìn)行融合，使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是_________，細(xì)胞融合的原理是_________。

（3）將融合細(xì)胞在_________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用_________技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（4）將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過_________或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲取大量的單克隆抗體。

（5）治療乳腺癌時(shí)，可單獨(dú)使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物 結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細(xì)胞。這充分體現(xiàn)了單克隆抗體_________的特點(diǎn)。

Answer 1

【答案】 低表達(dá) 胞外 骨髓瘤 PEG（或聚乙二醇） 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 選擇 抗原一抗體雜交 體外培養(yǎng) 特異性強(qiáng)（識(shí)別抗原部位專一）

【解析】本題涉及到基因工程、細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體的制備等知識(shí)點(diǎn)。主要考察的是單克隆抗體的制備過程，在此過程中有兩次篩選，一次是在選擇培養(yǎng)上得到雜交瘤細(xì)胞，第二次是進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)陽(yáng)性，篩選出能夠產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（2）制備單克隆抗體的過程中，應(yīng)把小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑為聚乙二醇，細(xì)胞融合時(shí)遵循的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。

（3）融合后的細(xì)胞有多種，需要在選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選，只有雜交瘤細(xì)胞能夠生長(zhǎng)；在多孔培養(yǎng)板上，吸取克隆生長(zhǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)孔中的上清液進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)時(shí)采用的方法是抗原-抗體雜交的方法。

（4）雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)可以采用體外培養(yǎng)或小鼠腹腔中進(jìn)行培養(yǎng)的方法，可以獲得大量的單克隆抗體。