Question

8．飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動(dòng)物吸收利用，還影響對(duì)其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用．若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等．下圖是學(xué)生們從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶菌株的過程．

（1）分離產(chǎn)植酸酶的菌株，需先配制合適的培養(yǎng)基．配制培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后和倒平板前，要進(jìn)行的是調(diào)pH、分裝和滅菌．對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．倒平板時(shí)，一般需冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近操作．依物理性質(zhì)看，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基．依功能看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）接種以前進(jìn)行的一系列稀釋操作，目的是在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，這種接種方法是稀釋涂布平板法．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能大致推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)．如果圖示過程接種的培養(yǎng)基上平均有40個(gè)菌落，則1g土壤中大致的活菌數(shù)量是4×10⁷個(gè)．該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少．
（3）由于植酸鈣的不溶解性，可使培養(yǎng)基形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A～E五種菌株中，E是產(chǎn)植酸酶的理想菌株．

Answer 1

分析 1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法：計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板．
2、稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上分離、培養(yǎng)出微生物的單個(gè)菌落，以便于計(jì)數(shù)、移植、分離，從而達(dá)到純培養(yǎng)的目的．
3、由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．

解答 解：（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都融化后和分裝前，要進(jìn)行的是調(diào)pH和滅菌．對(duì)培養(yǎng)基滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．根據(jù)倒平板操作可知，該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基．該培養(yǎng)基的作用是從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶菌株，屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）接種以前進(jìn)行的一系列稀釋操作，表明該接種方式為稀釋涂布平板法，目的是在培養(yǎng)皿表面形成單個(gè)菌落．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能大致推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)．如果按題中處理后，統(tǒng)計(jì)的平板上平均有40個(gè)菌落，則1g土壤中大致的活菌數(shù)量=40÷0.1×10⁵═3×10⁷．由于2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí)在培養(yǎng)基上形成的是一個(gè)菌落，因此該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少．
（3）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)生植酸酶．分析題圖可知，菌落E周圍的透明圈最大，是產(chǎn)植酸酶的理想菌株．
故答案為：
（1）調(diào)pH　高壓蒸汽滅菌　固體　選擇　
（2）單個(gè)菌落　稀釋涂布平板法　4×10⁷　  少
（3）E

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)過程中的無菌技術(shù)，統(tǒng)計(jì)樣品中菌落數(shù)的方法，主要考查學(xué)生對(duì)微生物培養(yǎng)知識(shí)的掌握和利用微生物培養(yǎng)技術(shù)解決生產(chǎn)、生活中問題的能力．