【題目】動物細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠緣雜交成為可能,F(xiàn)在己經(jīng)廣泛應用于多種學科的研究:新發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù),為制備單克隆抗體開辟了新途徑。研究表明DNA合成有兩條途徑:“S途徑”和“D途徑”,淋巴細胞(漿細胞)有“S途徑”和“D途徑”;骨髓瘤細胞只有“D途徑”;HAT培養(yǎng)液中氨基喋呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖;卮鹣铝袉栴}:

___________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。

⑵單克隆細胞是指__________________________________________________。

⑶單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是____________。

⑷雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的_____________特點,又具備淋巴細胞的__________特點。

⑸圖示過程,有兩次的篩選。第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細胞,那么淋巴細胞(漿細胞)在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_________,骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_______。

【答案】1)細胞培養(yǎng)技術(shù)、細胞融合技術(shù) (2)單個細胞增殖,形成的細胞群

3)特異性強,靈敏度高 (4)在體外大量增殖(無限增殖) 分泌特異性抗體

5)缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力 其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進行DNA復制

【解析】1)細胞培養(yǎng)技術(shù)、細胞融合技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。

2)單克隆細胞是指單個細胞增殖,形成的細胞群。

3)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是特異性強,靈敏度高,可大量制備。

4)雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的在體外大量增殖(無限增殖)的特點,又具備淋巴細胞能分泌特異性抗體的特點。

5)圖示過程中有兩次的篩選,第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細胞,那么淋巴細胞(效應B細胞)在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力;骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進行DNA復制。

項目

第一次篩選

第二次篩選

篩選原因

誘導融合后得到多種雜交細胞,另外還有未融合的細胞

由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激,所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細胞

篩選方法

用特定的選擇培養(yǎng)基篩選:未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、瘤瘤細胞)都會死亡,只有融合的雜交瘤細胞(“B細胞)才能生長

用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng),在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群

篩選目的

得到雜交瘤細胞

得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞

練習冊系列答案
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B. 體液調(diào)節(jié)依靠體液的運輸

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A在實驗結(jié)束時甲、乙兩罐中產(chǎn)生的二氧化碳量之比為8:5

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D該實驗證明向葡萄糖溶液中通入適量的氧氣可以提高酒精的產(chǎn)量

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