Question

【題目】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能�，F(xiàn)在己經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種學(xué)科的研究：新發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。研究表明DNA合成有兩條途徑：“S途徑”和“D途徑”，淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)有“S途徑”和“D途徑”；骨髓瘤細(xì)胞只有“D途徑”；HAT培養(yǎng)液中氨基喋呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

⑴___________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。

⑵單克隆細(xì)胞是指__________________________________________________。

⑶單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是____________。

⑷雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的_____________特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的__________特點(diǎn)。

⑸圖示過(guò)程，有兩次的篩選。第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞，那么淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)在HAT培養(yǎng)液中不生長(zhǎng)的原因是_________，骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中不生長(zhǎng)的原因是_______。

Answer 1

【答案】（1）細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù) （2）單個(gè)細(xì)胞增殖，形成的細(xì)胞群

（3）特異性強(qiáng)，靈敏度高 （4）在體外大量增殖（無(wú)限增殖） 分泌特異性抗體

（5）缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力 其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制

【解析】（1）細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。

（2）單克隆細(xì)胞是指單個(gè)細(xì)胞增殖，形成的細(xì)胞群。

（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。

（4）雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的在體外大量增殖（無(wú)限增殖）的特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞能分泌特異性抗體的特點(diǎn)。

（5）圖示過(guò)程中有兩次的篩選，第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞，那么淋巴細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）在HAT培養(yǎng)液中不生長(zhǎng)的原因是缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力；骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中不生長(zhǎng)的原因是其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制。

項(xiàng)目	第一次篩選	第二次篩選
篩選原因	誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞
篩選方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞（“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞）都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞（“B瘤”細(xì)胞）才能生長(zhǎng)	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群
篩選目的	得到雜交瘤細(xì)胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞