Question

【題目】基因工程在育種、疾病預(yù)防、疾病治療等方面都有著非常廣闊的應(yīng)用前景。請(qǐng)回答下列問題：

（1）通過PCR擴(kuò)增目的基因需要經(jīng)過變性、___________、延伸三步循環(huán)。若目的基因來自嗜熱菌(生存環(huán)境溫度60℃～80℃)，則變性溫度更______________(填高或低)，原因是__________________________________________________________________________。

（2）已知A、B兩種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)不同，用A和B分別切割質(zhì)粒和目的基因后，仍可以通過DNA連接酶構(gòu)建表達(dá)載體，原因可能是_____________________。

（3）將重組DNA分子導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是_________。檢測(cè)目的基因是否插入受體細(xì)胞的DNA中時(shí)，采用_________技術(shù)。

（4）2017年我國科學(xué)家發(fā)明了制備流感病毒活疫苗的方法：通過一定方式改造病毒部分基因，將改造基因和_________(填“致病基因”或“表面抗原基因”)等基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，再將其導(dǎo)入人為改造過的宿主細(xì)胞內(nèi)，產(chǎn)生大量能侵染正常細(xì)胞但不具備增殖能力的子代病毒，用于制備疫苗。與滅活疫苗比較，該病毒活疫苗的顯著優(yōu)點(diǎn)之一是可引起_________免疫，增強(qiáng)免疫效果。

Answer 1

【答案】復(fù)性 高 嗜熱菌生存的環(huán)境溫度高，則其DNA熱穩(wěn)定性強(qiáng)，解開DNA雙螺旋需要的溫度高 A、B兩種限制酶切割DNA分子產(chǎn)生的黏性末端相同或產(chǎn)生的都是平末端 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 DNA分子雜交 表面抗原基因 細(xì)胞

【解析】

免疫是指身體對(duì)抗病原體引起的疾病的能力，特異性免疫包含細(xì)胞免疫和體液免疫。疫苗是將病原微生物（如細(xì)菌、立克次氏體、病毒等）及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用轉(zhuǎn)基因等方法制成的用于預(yù)防傳染病的自動(dòng)免疫制劑。疫苗保留了病原菌刺激動(dòng)物體免疫系統(tǒng)的特性。當(dāng)動(dòng)物體接觸到這種不具傷害力的病原菌后，免疫系統(tǒng)便會(huì)產(chǎn)生一定的保護(hù)物質(zhì)，如免疫激素、活性生理物質(zhì)、特殊抗體等；當(dāng)動(dòng)物再次接觸到這種病原菌時(shí)，動(dòng)物體的免疫系統(tǒng)便會(huì)依循其原有的記憶，制造更多的保護(hù)物質(zhì)來阻止病原菌的傷害。

（1）PCR是體外復(fù)制DNA的一種技術(shù)，需要經(jīng)過變性（高溫解旋）、復(fù)性（降溫，引物結(jié)合）、延伸（合成子鏈）三步循環(huán)。若目的基因來自嗜熱菌(生存環(huán)境溫度60℃～80℃)，嗜熱菌生存的環(huán)境溫度高，則其DNA熱穩(wěn)定性強(qiáng)，解開DNA雙螺旋需要的溫度高，因此變性溫度更高。

（2）A、B兩種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)不同，用A和B分別切割質(zhì)粒和目的基因后，若A、B兩種限制酶切割DNA分子產(chǎn)生的黏性末端相同或產(chǎn)生的都是平末端，仍可以通過DNA連接酶構(gòu)建表達(dá)載體。

（3）農(nóng)桿菌可以侵染植物細(xì)胞，將重組DNA分子導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。檢測(cè)目的基因是否插入受體細(xì)胞的DNA中時(shí)，采用DNA分子雜交技術(shù)，原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)。

（4）將改造基因和表面抗原基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，再將其導(dǎo)入人為改造過的宿主細(xì)胞內(nèi)，產(chǎn)生大量能侵染正常細(xì)胞但不具備增殖能力的子代病毒，用于制備疫苗，致病基因表達(dá)后毒性大，不能用于制備疫苗。與滅活疫苗（一種物質(zhì)，不會(huì)侵染免疫）比較，該病毒活疫苗的顯著優(yōu)點(diǎn)之一是可引起細(xì)胞免疫，增強(qiáng)免疫效果。