Question

6．我省的黑龍港地區(qū)土地鹽堿化嚴(yán)重，耐鹽堿植物的開(kāi)發(fā)一直備受關(guān)注．科學(xué)家用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將耐鹽基因倒入玫瑰，培育出了耐鹽四季玫瑰．據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）若要獲得耐鹽基因可以利用從基因文庫(kù)獲取、人工合成法、PCR等技術(shù)或來(lái)源．
（2）獲得的耐鹽基因與質(zhì)粒構(gòu)建成重組分子，最終構(gòu)建好的該環(huán)狀分子稱(chēng)為表達(dá)載體（或重組DNA、重組質(zhì)粒），目的基因能在不同生物體內(nèi)正常表達(dá)原來(lái)的蛋白質(zhì)，說(shuō)明整個(gè)生物界共用一套密碼子．
（3）限制性核酸內(nèi)切酶作用于圖中的a處，DNA鏈接酶作用于圖中的a處，其對(duì)應(yīng)的化學(xué)鍵名稱(chēng)為磷酸二酯鍵．
（4）質(zhì)粒作為載體，具有的標(biāo)記基因的作用為鑒別并篩選含有目的基因的受體細(xì)胞，啟動(dòng)子的作用為RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄出mRNA．耐鹽基因?qū)�入受體細(xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，還需用到植物細(xì)胞工程中的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，來(lái)最終獲得轉(zhuǎn)基因植物．
（5）在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)可以用放射性同位素標(biāo)記的耐鹽基因做探針進(jìn)行分子水平的雜交檢測(cè)，檢測(cè)耐鹽蛋白可用抗原一抗體雜交方法進(jìn)行分子水平檢測(cè)．

Answer 1

分析 1、分析題圖：a處為磷酸二酯鍵，b處為氫鍵，限制酶作用于磷酸二酯鍵，而不是氫鍵；
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．在把表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞時(shí)，對(duì)于動(dòng)物、植物、細(xì)菌是不一樣的這里要區(qū)分清楚，最后一步在鑒定時(shí)可以用DNA分子雜交法，抗原抗體雜交法，還有特性驗(yàn)證試驗(yàn)法．最簡(jiǎn)單的就是移植到鹽堿地中看是否具有抗性．

解答 解：（1）獲取目的基因的方法：從基因文庫(kù)獲取、人工合成法、PCR等技術(shù)或來(lái)源．
（2）獲得的耐鹽基因與質(zhì)粒構(gòu)建成重組分子，最終構(gòu)建好的該環(huán)狀分子稱(chēng)為表達(dá)載體（或重組DNA、重組質(zhì)粒）；由于自然界中所有生物共用一套遺傳密碼子，因此一種生物的基因能在另一種生物體內(nèi)表達(dá)．
（3）限制性核酸內(nèi)切酶作用于磷酸二酯鍵，即圖中的a處；DNA鏈接酶的作用是連接DNA片段形成磷酸二酯鍵，因此其也作用于圖中的a處．
（4）質(zhì)粒作為載體，具有的標(biāo)記基因的作用為鑒別并篩選含有目的基因的受體細(xì)胞；啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄出mRNA．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株，還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（5）在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)可以用放射性同位素標(biāo)記的耐鹽基因做探針進(jìn)行分子水平的雜交檢測(cè)；檢測(cè)耐鹽蛋白可用抗原一抗體雜交方法進(jìn)行分子水平檢測(cè)．
故答案為：
（1）從基因文庫(kù)獲取    人工合成法    PCR（只要合理即可給分）
（2）表達(dá)載體（或重組DNA、重組質(zhì)粒）    共用一套密碼子
（3）a     a  磷酸二酯鍵
（4）鑒別并篩選含有目的基因的受體細(xì)胞    RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄出mRNA   農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    植物組織培養(yǎng)
（5）探針  抗原一抗體雜交

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．