Question

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟，其中的核心步驟是

 

；
（2）若要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的

 

中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的

 

上．植物組織培養(yǎng)的主要原理是植物細(xì)胞具有

 

，具體過程是在

 

和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的條件，誘導(dǎo)其經(jīng)過

 

產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株．
（3）在哺乳動物的核轉(zhuǎn)移實驗中，通過一定的措施將受體細(xì)胞激活，使其進(jìn)行細(xì)胞分裂和發(fā)育，當(dāng)胚胎發(fā)育到

 

階段時，將胚胎移入受體（代孕）動物體內(nèi)．
（4）生態(tài)工程是實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一，請寫出它遵循的基本原理（至少答兩項）：

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動物細(xì)胞核移植技術(shù),生態(tài)工程依據(jù)的生態(tài)學(xué)原理

專題：

分析：1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、植物組織培育的具體過程為：外植體

脫分化

愈傷組織

再分化

新植體．

解答： 解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測與表達(dá)，其中基因表達(dá)載體的構(gòu)建是核心步驟．
（2）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上．植物組織培養(yǎng)的主要原理是植物細(xì)胞具有全能性，具體過程是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的條件，誘導(dǎo)其經(jīng)過脫分化產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株．
（3）胚胎移植的最佳時期是桑椹胚或囊胚階段．
（4）生態(tài)工程遵循的基本原理包括：物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建
（2）T-DNA     染色體DNA  全能性      無菌      去分化（脫分化）
（3）桑椹胚或囊胚
（4）物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理

點(diǎn)評：本題考查基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程和生態(tài)工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作步驟及各操作步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)；識記植物組織培育的原理及過程；識記胚胎移植的基本程序；識記生態(tài)工程的原理，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．