Question

（12分）科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如下圖，請回答相關問題：

（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過__________________技術(shù)獲得重組細胞，接受細胞核的去核卵母細胞應該處于___________________時期。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其_______________分離出ES細胞。步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的__________________。構(gòu)建之前可以利用_____________________技術(shù)對目的基因進行擴增。

（3）將基因?qū)�入ES細胞常用的方法是________________________。體外誘導ES細胞向不同方向分化是利用了ES細胞的_________________。

（4）為檢測干擾素基因的表達情況，可采用__________________方法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功表達。

Answer 1

（1）核移植 MⅡ

（2）內(nèi)細胞團 （基因）表達載體 PCR

（3）顯微注射 全能性

（4）抗原一抗體雜交

【解析】

試題分析：

（1）把上皮細胞導入去核的卵母細胞的過程為細胞核移植，可以得到重組細胞，通過培養(yǎng)獲得重組胚胎；去核的卵母細胞必須培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才用于核移植。

（2）過程②為早期胚胎培養(yǎng)，在囊胚期的內(nèi)細胞團細胞即為胚胎干細胞；步驟③為導入外源基因，構(gòu)建基因表達載體后才能導入受體細胞；構(gòu)建基因表達載體之前可以用PCR技術(shù)進行擴增。

（3）將目的基因?qū)�入動物細胞的方法是顯微注射法；ES細胞可以誘導向不同的方向分化，利用的ES的全能性的特點。

（4）目的基因在受體細胞內(nèi)通過轉(zhuǎn)錄和翻譯合成了相應的蛋白質(zhì)，說明了目的基因已經(jīng)成功表達，而檢測蛋白質(zhì)的方法是抗原—抗體雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，說明了目的基因已經(jīng)完成了表達。

考點：本題考查細胞工程、基因工程的有關知識，意在考查考生識圖能力、識記能力和理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。