Question

【題目】酸奶是以牛奶為主要原料，經(jīng)乳酸菌發(fā)酵制成的一種營養(yǎng)豐富的保健飲品，現(xiàn)對酸奶中的乳酸菌進行篩選、分離，步驟如下：

牛奶→酸奶→稀釋10倍→涂布MRS瓊脂培養(yǎng)基→36±1℃、厭氧下培養(yǎng)→挑取單個菌落→接種于MRS瓊脂平板→菌種鑒定→接種于MRS液體培養(yǎng)基→菌種保藏。

請回答下列相關(guān)問題：

（1）制作酸奶時一般要在牛奶中添加少量的蔗糖，除了可以調(diào)味外，還可以成為乳酸菌利用的_______之一，攪勻后要對原料進行消毒，消毒方法宜選用_____________法

（2）剛消毒完的牛奶必須冷卻，然后按一定比例將市售優(yōu)質(zhì)酸奶加入并攪勻，根據(jù)乳酸菌的代謝特點，容器必須____________，然后發(fā)酵。

（3）制備稀釋液時，先將酸奶樣品充分搖勻，以無菌吸管吸取樣品____________mL放入裝有270mL無菌水的錐形瓶中，充分振蕩，制成1：10的樣品液。

（4）為了便于統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目，應(yīng)使用______________法將菌種接種于MRS瓊脂平板，36±1℃、厭氧條件下倒置培養(yǎng)48h后，再挑取單個菌落，根據(jù)菌落的形狀和______________（請寫出兩點）等特征進行菌種鑒定。

（5）菌種鑒定后將其接種至MRS液體培養(yǎng)基的目的是_______________。將得到的純種菌株進行長期保藏時，可采用_____________的方法。

Answer 1

【答案】碳源（碳源和能源物質(zhì)）??? 巴氏消毒??? 密封??? 30??? 稀釋涂布平板法??? 大小、隆起程度、顏色??? 擴大培養(yǎng)，增加菌種數(shù)目??? 甘油管藏???

【解析】

1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

2、實驗室常用的消毒方法：煮沸消毒；化學(xué)藥物消毒；紫外線消毒。

3、乳酸菌是厭氧型微生物，在無氧條件下將有機物分解成乳酸。

（1）蔗糖可以為微生物的培養(yǎng)提供碳源和能源，為了保證牛奶的有效成分不被高溫分解，所以消毒方法是巴氏消毒法。

（2）乳酸菌是厭氧型微生物，所以容器必須密封，保證無氧環(huán)境。

（3）要制成制成1∶10的樣品液，需要取30mL酸奶樣品裝入270mL無菌水的錐形瓶中。

（4）統(tǒng)計活菌數(shù)目常用稀釋涂布平板法；根據(jù)菌落的形狀和大小、隆起程度、顏色進行菌種鑒定。

（5）將菌種接種在液體培養(yǎng)基的目的是擴大培養(yǎng)，增加菌種數(shù)目；菌種長期保藏的方法是甘油管藏法。