Question

17．我市葡萄種植基地為解決葡萄滯銷易腐爛問題，引進(jìn)果酒、果醋生產(chǎn)線進(jìn)行葡萄的深加工，獲得了較好效益，其生產(chǎn)流程如圖所示，據(jù)圖回答：

（1）在篩選菌種A時(shí)，需要在接種前用高壓蒸汽滅菌法對(duì)葡萄果汁進(jìn)行滅菌．對(duì)于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法．
（2）在純化菌種A時(shí)接種了5個(gè)平板，每個(gè)平板均接種了0.1mL樣品并培養(yǎng)．其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是稀釋涂布平板法，推測出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻．其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落數(shù)分別是180、220、480、200，則樣品中菌種A的數(shù)量為2000個(gè)/mL，用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，一般低于（低于、高于）實(shí)際值．
（3）如圖所示，候選菌B是醋酸（桿）菌菌，接種后發(fā)酵條件與果酒發(fā)酵不同之處是升高溫度（至30-35℃）和通入無菌氧氣．
（4）與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和細(xì)胞分裂素，植物組織培養(yǎng)技術(shù)的關(guān)鍵步驟是脫分化和再分化．

Answer 1

分析 1、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌及灼燒滅菌．
2、微生物接種常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者常用來統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，但統(tǒng)計(jì)的數(shù)目往往比實(shí)際值低，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落．
3、對(duì)于頻繁使用的菌種常采用斜面保藏法，對(duì)于需要長期保存的菌種可以采用甘油管藏的方法．
4、分析題圖：圖示表示兩種微生物的篩選、分離、純化的過程及果酒和果醋的制作過程，其中候選菌A是酵母菌，候選菌B是醋酸（桿）菌．

解答 解：（1）葡萄果汁作為篩選菌種A時(shí)的培養(yǎng)基需要在接種前用高壓蒸汽滅菌進(jìn)行滅菌；需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏法．
（2）分析圖乙中培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果，可以推知采用的純化方法是稀釋涂布平板法；平板乙中的菌落分布很不均勻，可能的操作失誤是涂布不均勻?qū)е碌�；菌落�?shù)在30～300的平板適于計(jì)數(shù)（菌落數(shù)是480的丁平板應(yīng)舍棄），可計(jì)算樣品中菌種A的數(shù)量=（180+220+200）÷3÷0.1=2000 個(gè)/mL，由于稀釋涂布平板法的個(gè)別菌落可能來自于兩個(gè)和多個(gè)細(xì)胞，所以用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，一般低于實(shí)際值．
（3）由以上分析知，候選菌B是醋酸（桿）菌，與果酒發(fā)酵時(shí)的酵母菌不同，醋酸菌是嗜溫、好氧菌，所以接種醋酸菌后發(fā)酵條件與果酒發(fā)酵不同之處是：升高溫度（至30-35℃）和通入無菌氧氣．
（4）植物組織培養(yǎng)時(shí)，離體的植物組織和細(xì)胞，對(duì)營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊，需要配置特殊的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中通常需要添加生長素和細(xì)胞分裂素，脫分化和再分化是植物組織培養(yǎng)技術(shù)的關(guān)鍵步驟．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌      甘油管藏
（2）稀釋涂布平板法    涂布不均勻   2000   低于
（3）醋酸（桿）菌     升高溫度（至30-35℃）      通入無菌氧氣
（4）生長素    細(xì)胞分裂素    脫分化     再分化

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合果酒、果醋生產(chǎn)流程圖，考查微生物的篩選、分離和計(jì)數(shù)，果酒、果醋的制作，植物組織培養(yǎng)的知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．