2．(江蘇省黃橋2013月考)花粉粒通道法是指利用植物受精后花粉萌發(fā)形成的花粉管通道，將目的基因?qū)�入尚不具備�?xì)胞壁的合子，形成含有目的基因的胚。經(jīng)培養(yǎng)、篩選，可獲得有特定性狀的轉(zhuǎn)基因植株。下列有關(guān)說(shuō)法中不正確的是(　　)

A．為了減少盲目性，可以通過(guò)人工合成的途徑來(lái)獲得目的基因

B．目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，通過(guò)植物組織培養(yǎng)才能獲得相應(yīng)的植株

C．所得轉(zhuǎn)基因植株個(gè)體發(fā)育的起點(diǎn)是受精卵，形成該植株時(shí)無(wú)脫分化過(guò)程

D．將目的基因?qū)�入葉綠體DNA中，可避免目的基因通過(guò)花粉傳遞而造成“基因污染”

1.下圖為DNA分子的某一片段，其中①②③分別表示某種酶的作用部位，則相應(yīng)的酶依次是(　　)

A．DNA連接酶、限制酶、解旋酶

B．限制酶、解旋酶、DNA連接酶

C．解旋酶、限制酶、DNA連接酶

D．限制酶、DNA連接酶、解旋酶

下圖是利用PCR技術(shù)和電泳技術(shù)進(jìn)行的某一次親子鑒定結(jié)果圖譜，請(qǐng)根據(jù)圖譜和所學(xué)知識(shí)回答問(wèn)題。

(1)PCR技術(shù)能把某一DNA分子片段進(jìn)行擴(kuò)增。它是利用了DNA的________原理，通過(guò)控制________來(lái)控制DNA________與結(jié)合。

(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA的過(guò)程中還需要________酶的作用，但它必須在相應(yīng)的________的作用下才能完成對(duì)DNA的復(fù)制。假若有一段DNA序列為：

5′—GTTAACCTTAG—3′

3′—CAATTGGAATC—5′

所用引物Ⅰ為：5′—GTTA—OH，則引物Ⅱ?yàn)椋篲_______。

(3)圖①是把含有21個(gè)氨基酸的多肽進(jìn)行水解，得到的氨基酸混合物進(jìn)行電泳的結(jié)果，故可推知該多肽由________種氨基酸構(gòu)成。

(4)圖②為通過(guò)提取某小孩和其母親，以及待測(cè)定的四位男性的DNA，分別由酶處理后，生成含有若干DNA片段，并進(jìn)行擴(kuò)增得到的混合物，然后進(jìn)行電泳所得到的一組DNA指紋圖譜，請(qǐng)分析：F₁～F₄中，你認(rèn)為圖②中________是該小孩真正生物學(xué)上的父親。為什么？________________________________________________________________________。

5．根據(jù)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的相關(guān)知識(shí)及胡蘿卜素的性質(zhì)，回答下列問(wèn)題。

(1)胡蘿卜素是__________色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用__________作為溶劑，原因是__________。

(2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是__________法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是：粉碎、干燥、__________、__________、__________。

(3)在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格將__________和__________控制在一定范圍內(nèi)，原因是__________。

(4)提取的胡蘿卜素可通過(guò)__________法進(jìn)行鑒定，在鑒定過(guò)程中需要用__________對(duì)照。

(5)一般情況下，提取胡蘿卜素時(shí)，提取效率與原料顆粒的含水量成__________比。

4．科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種擴(kuò)展力活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。

(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的__________、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的__________不同而實(shí)現(xiàn)分離。

(2)可用金黃色葡萄球菌來(lái)檢驗(yàn)該蛋白的體外抗菌特性抗菌實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供__________和__________。

(3)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的__________，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

(4)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有__________和__________。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行__________處理。

3．PCR技術(shù)有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行研究的問(wèn)題，而被廣泛應(yīng)用，此過(guò)程需要一種TaqDNA聚合酶。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：

(1)體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程中用解旋酶打開(kāi)雙鏈DNA，而PCR技術(shù)中應(yīng)用__________。

(2)TaqDNA聚合酶是從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離的。①為什么Taq細(xì)菌能從熱泉中被篩選出來(lái)呢？__________________。

②TaqDNA聚合酶的功能是__________。

③TaqDNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，可用__________法和__________法進(jìn)行分離。

④為了使TaqDNA聚合酶能夠多次反復(fù)利用，可采用__________技術(shù)，常用的方法為_(kāi)_________。

(3)從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)采取的措施是__________________，原因是__________________。

(4)相對(duì)于細(xì)菌分離，DNA分子的分離和提取操作要復(fù)雜得多。

①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，其目的分別是________________、________________。

②實(shí)驗(yàn)中能否以哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料？為什么？________________________。

(5)與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較，PCR反應(yīng)要在__________中才能進(jìn)行，并且要嚴(yán)格控制__________條件。

(6)PCR中加入的引物有__________種，加入引物的作用是__________。

2．在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析。PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝，有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題：

(1)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出引物Ⅱ，并在復(fù)性這一步驟中將引物Ⅱ置于合適的位置。

(2)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出循環(huán)一次后生成的DNA分子。

(3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用³²P標(biāo)記，請(qǐng)分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點(diǎn)：__________，循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為_(kāi)_________。

(4)PCR反應(yīng)過(guò)程的前提條件是__________，PCR技術(shù)利用了DNA的__________原理解決了這個(gè)問(wèn)題。

(5)在對(duì)樣品DNA分析過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，DNA摻雜著一些組蛋白，要去除這些組蛋白可加入的物質(zhì)是__________。

1.現(xiàn)代生物學(xué)已向兩個(gè)方面發(fā)展，宏觀研究的水平為生態(tài)系統(tǒng)水平，微觀研究的水平為分子水平。對(duì)于分子的研究，其物質(zhì)的提取和分離顯得尤為重要。下面是物質(zhì)提取和分離的相關(guān)問(wèn)題，請(qǐng)回答：

(一)DNA分子的提取和分離

(1)在提取菜花細(xì)胞中的DNA時(shí)，采用的是研磨法，為什么不能像用雞血那樣，用蒸餾水使其破裂？

(2)在提取實(shí)驗(yàn)過(guò)程中用到兩種濃度的NaCl溶液，說(shuō)明其作用：

①2 mol/LNaCl溶液：____________________；

②0.14 mol/L NaCl溶液：________________。

(3)在整個(gè)操作過(guò)程中，每100 mL血液中加入3 g檸檬酸鈉的作用是__________。

(4)鑒定DNA所用的試劑是__________。

(二)血紅蛋白的提取和分離

(1)在血紅蛋白的提取和分離過(guò)程中：粗分離、純化和純度鑒定時(shí)，都會(huì)用到緩沖溶液，其作用是__________。

(2)在洗脫過(guò)程中，對(duì)洗脫液的流速要求穩(wěn)定的目的是__________。

(三)不同的化學(xué)物質(zhì)，其理化特性不同，提取方法也有所差異，如胡蘿卜素不溶于水，易溶于__________，因此可以用__________方法進(jìn)行提取。

3．(2012·江蘇)某研究組對(duì)秈稻開(kāi)展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)2，4—D常用于秈稻愈傷組織的誘導(dǎo)，對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需__________(填“升高”、“保持”或“降低”) 2，4—D的濃度。

(2)當(dāng)秈稻愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但不能繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加__________，以促進(jìn)幼苗形成。

(3)研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是__________(填下列序號(hào))。

①綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散　�、趧�?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離　③胚狀體細(xì)胞中有葉綠體�、芊只�的愈傷組織內(nèi)各細(xì)胞的形態(tài)大小一致

(4)經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的秈稻葉綠素突變體，其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對(duì)照，葉綠素總量不變。某同學(xué)用__________(填序號(hào)：①綠色②紅色③藍(lán)紫色④黃色)光照射突變體和對(duì)照葉片，檢測(cè)到兩者光合放氧速率差異不大。若取等量色素提取液進(jìn)行層析，會(huì)發(fā)現(xiàn)突變體第__________條色素帶(自上而下)窄于對(duì)照組。

(5)胚乳(3n)由一個(gè)精子與兩個(gè)極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導(dǎo)愈傷組織，培育三倍體，需適時(shí)剔除胚，以免胚的存在影響愈傷組織細(xì)胞的__________，還可避免再生苗中混有__________。

2．(2012·江蘇)下列關(guān)于酶和固定化酵母細(xì)胞的研究與應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)

A．從酶的固定方式看，吸附法比化學(xué)結(jié)合法對(duì)酶活性影響小

B．作為消化酶使用時(shí)，蛋白酶制劑以口服方式給藥

C．尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過(guò)氧化氫酶，可以反復(fù)使用

D．將海藻酸鈉凝膠珠用無(wú)菌水沖洗，目的是洗去CaCl₂和雜菌