有關生物技術的操作過程或應用的敘述，錯誤的是（ ）

A.測定泡菜中亞硝酸鹽含量時需要標準顯色液

B.可用聚乙二醇促進植物細胞原生質(zhì)體的融合

C.胚胎分割技術可看做是動物無性繁殖的方法

D.以尿素作為唯一碳源的培養(yǎng)基用于鑒別細菌

尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同學要分離出土壤中能分解尿素的細菌，并嘗試進行計數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：

K2HPO4 NaCl H2O 葡萄糖 尿素 酚紅 瓊脂

0.12g 0.12g 15mL 0.025g 2.0g 0.25mg 0.5g

（1）分解尿素的細菌都能合成 脲酶 ，該種細菌在生態(tài)平衡中起到什么作用？ 參與了氮循環(huán)（或維持氮平衡） ．寫出細菌分解尿素的方程式 ．

（2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？ 不能 （能/不能），原因是 瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物 ．

（3）分離得到分解尿素的細菌后，如果要擴大培養(yǎng)，則應選擇 培養(yǎng)基進行培養(yǎng)．培養(yǎng)一段時間后，使用 對微生物細胞進行計數(shù)．計數(shù)過程中，下列哪種行為會影響計數(shù)的準確性 A

A．計數(shù)時直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進行計數(shù)

B．如果方格內(nèi)微生物細胞數(shù)量多于300 個，培養(yǎng)液先稀釋后再計數(shù)

C．如果微生物細胞有粘連，要數(shù)出團塊中的每一個細胞

D．壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數(shù)

（4）為了提高尿素肥效，可以將分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技術．

土壤是“微生物的天然培養(yǎng)基”，下面是有關土壤中分解尿素的細菌分離和計數(shù)的實驗過程，請根據(jù)圖回答相關問題：

（1）能分解尿素的細菌代謝類型為 異氧需氧型 ，應從富含有機質(zhì)的土壤表層取土樣．

（2）為分離出土壤中分解尿素的細菌，應該用 尿素為唯一氮源 的培養(yǎng)基進行分離，并加入 酚紅 指示劑進行鑒別．

（3）若取土樣5g，應加入 45 ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．因土壤中細菌密度很大，需要不斷加以稀釋，配制成如圖所示的不同濃度的土壤溶液．取樣稀釋前，一定要 搖均 以減少誤差．將103﹣107倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用 涂布器（玻璃刮刀） 將菌液鋪平．這種接種方法稱為 稀釋涂布（平板）法 ．

（4）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有 紅色環(huán)帶 （現(xiàn)象）的菌落數(shù)，結果如下表，其中 105或106 倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數(shù) 103 104 105 106 107

菌落數(shù)（個） 500 367 248 36 18

【生物﹣選修1生物技術實踐】

某研究小組設計了以下實驗探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）．實驗步驟如圖所示，培養(yǎng)基成分如表所示．請分析回答問題：

KH2PO4 1.4g

Na2HPO4 2.1g

MgSO4?7H2O 0.2g

葡萄糖 10.0g

尿素 1.0g

瓊脂 15.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選 目的菌 ，這種培養(yǎng)基屬于 選擇 培養(yǎng)基．

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的 尿素 和 葡萄糖 ，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是 為目的菌提供氧氣 ．

（3）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用 涂布平板（劃線） 的方法接種，獲得 單菌落 后繼續(xù)篩選．

（4）下列材料或用具中：①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手．需要滅菌的是 ①② ；需要消毒的是 ③ ．（填序號）

（5）在進行分離分解尿素的細菌的實驗時，A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落．A同學的實驗結果產(chǎn)生的原因可能有 ①②③ （填序號）．

①由于土樣不同 ②由于培養(yǎng)基污染 ③由于操作失誤 ④沒有設置對照

（6）在該實驗中，可以通過檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解，所依據(jù)的原理是 微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高 ．所用方法是在培養(yǎng)基中加入 酚紅指示劑 ，若尿素被分解，則培養(yǎng)基變成紅色．

（2007?茂名一模）【《普通高中課程標準實驗教科書生物選修①》教材】

微生物與人類關系密切．雖然有些微生物能使動植物患病，但多數(shù)微生物對人類是有益的．請回答有關微生物及其應用的試題：

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽．從土壤中分離分解尿素的細菌時，培養(yǎng)基中加的唯一氮源為 尿素 ，這種培養(yǎng)基稱為 選擇 培養(yǎng)基．

（2）在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 皿蓋上會凝有水珠，防止水珠落人培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好揮發(fā)

（3）微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和 稀釋涂布平板 法．在用平板劃線法接種時，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？ 第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其它微生物而污染培養(yǎng)基，每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落．劃線結束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對環(huán)境造成污染 在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 劃線結束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對環(huán)境造成污染

（4）荔枝是嶺南佳果，但季節(jié)性強，不耐儲藏．如果把荔枝制成果酒，則能明顯提高經(jīng)濟效益．在把荔枝制成果酒的過程中，很多因素會影響荔枝酒的產(chǎn)量．尤其是在制酒的第一步：把水果制成果汁時，出汁率較低，嚴重影響果酒產(chǎn)量．而果膠酶能明顯增加出汁率．為了解對于﹣定量的荔枝果泥，要使用多少果膠酶最合適，生物興趣小組同學提出了開展探究活動．請利用中學生物實驗室常用器材以及下列實驗材料用具，設計實驗

步驟（實驗課題名稱、結果預測等略）．

實驗材料和用具：荔枝果泥50ml、質(zhì)量濃度為5%的果膠酶母液20ml、大燒杯、相同規(guī)格試管若干支、溫度計、漏斗、量筒、吸管、濾紙等

設計實驗步驟：

①取四支試管，編號為A、B、C、D；

②另取三支試管，編號為a、b、c．向三支試管中分別加人果膠酶母液2ml、4ml、6ml，加蒸餾水至10ml配成不同濃度的果膠酶溶液；

③向A、B、C、D四支試管各加人10mi果泥，并從a、b、c三試管中吸取2ml果膠酶液加入A、B、C三支試管，吸2ml蒸餾水加入D試管；

④將四支試管放在盛有溫水的大燒杯中水浴30min；

⑤分別過濾出四支試管的果汁，并記錄果汁量． ．

（2014?蘭州模擬）尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌），培養(yǎng)基成分如表所示，實驗步驟如圖所示，請分析回答問題：

KH2PO4 1.4g

Na2HPO4 2.1g

MgSO4?7H2O 0.2g

葡萄糖 10g

尿素 1g

瓊脂 15g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100mL

（1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？為什么？ 不能，缺乏植物激素 ．

（2）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖．則獲得圖A效果的接種方法是 稀釋涂布平板法 ，圖B效果的接種方法是 平板劃線法 ，一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是 菌液濃度過高 （答出一條即可）．

（3）“目的菌”生長所需的氮源來自培養(yǎng)基中的 尿素 ，其同化作用類型是 異養(yǎng)型 ．

（4）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選到 能高效降解尿素的細菌（目的菌）， ，這種培養(yǎng)基從功能上屬于 選擇 培養(yǎng)基．

（2014?和平區(qū)二模）某生物興趣小組以帶有落葉的表層土壤（深5cm左右）為實驗材料，研究土壤微生物在適宜溫度下的分解作用，對土壤處理情況見下表．與此有關的敘述不正確的是（ ）

A.探究的問題是不同土壤濕度條件下，土壤微生物對落葉的分解作用

B.該實驗的自變量為土壤的是否滅菌處理，實驗中的對照組是1和3

C.為了控制實驗中的無關變量，作為實驗材料的落葉也應進行滅菌處理

D.預期結論是1、3組的落葉不被分解，2、4組中的落葉被不同程度的分解

（2013?惠州模擬）下列說法正確的是（ ）

A.從落葉豐富的土壤中篩選能分解纖維索的細菌

B.家庭利用酵母菌制作腐乳

C.用紅色西瓜汁作還原糖鑒定的替代材料

D.觀察線粒體時，利用甲甚綠染液將線粒體染成綠色，再用顯微鏡觀察

欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌，下列實驗操作中不正確的是（ ）

A.將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋

B.同一濃度的土壤稀釋液應至少涂布三個平板

C.可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照

D.用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細菌

為探究落葉是否在土壤微生物的作用下腐爛，下列各項構成了一個實驗設計，其中不符合實驗目的步驟是（ ）

A.可選擇帶有落葉的土壤為實驗材料，篩出落葉和土壤

B.將落葉平均分成兩份，把土壤也平均分成兩份

C.將滅菌的落葉設為實驗組，不做處理的落葉設為對照組

D.將落葉分別埋入兩組土壤中，觀察腐爛情況