植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用下圖所示圖解簡單表示：

(1)原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)包括___________、___________、______________三部分構(gòu)成。

(2)培育胚狀體利用了________________這一項(xiàng)生物技術(shù)，培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)外，還必須含有細(xì)胞分裂素、生長素等植物激素，還需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的________。

(3)獲得原生質(zhì)體后，需要對(duì)其活力進(jìn)行檢查，下列哪些實(shí)驗(yàn)最合適（   ）

A．觀察原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)是否完整           B．觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)

C．觀察細(xì)胞有絲分裂                     D．觀察葉綠體數(shù)目的多少

(4)一般在培養(yǎng)基上培養(yǎng)24～48小時(shí)后，大部分原生質(zhì)體已再分生出細(xì)胞壁。可以取樣，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通過______________________實(shí)驗(yàn)來鑒別細(xì)胞壁是否已經(jīng)再生。

(5)愈傷組織再分化形成的胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng)，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了____     __。

(6)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過程中，需要經(jīng)過（   ）

①無絲分裂  ②有絲分裂   ③減數(shù)分裂  ④原代培養(yǎng)    ⑤傳代培養(yǎng)  ⑥植物體細(xì)胞雜交    ⑦細(xì)胞融合  ⑧脫分化     ⑨再分化

A．①④⑤⑦⑧   B. ②④⑤⑥⑧⑨     C．②⑧⑨     D．③⑥⑧⑨

 (7)從圖解可知，可在避光條件下進(jìn)行的是_______ (用字母a～e回答)階段，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需培養(yǎng)到________。若為了獲得三七的人工種子，則需要培養(yǎng)到___________。

（10分）長期以來 ,香蕉生產(chǎn)遭受病害的嚴(yán)重威脅 ,制約了其發(fā)展。目前 ,隨著轉(zhuǎn)基因抗病香蕉基因工程技術(shù)的日趨成熟 ,為培育抗病香蕉品種開辟了新途徑。轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示，質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請回答：

(1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶              ，對(duì)           進(jìn)行切割。

(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有                ，作為標(biāo)記基因。

（3）能使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是：         (填字母序號(hào))。

A啟動(dòng)子   B終止子  C 復(fù)制原點(diǎn)   D標(biāo)記基因

（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用方法有多種，圖中所示方法為               。

（5）欲檢測目的基因是否表達(dá)成功，可采用的技術(shù)              (填字母序號(hào))。

A. 核酸分子雜交        B. 基因序列分析    C. 抗原-抗體雜交   D. PCR

(6)利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。香蕉組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)物質(zhì)外還必須含有                    等植物激素，它們會(huì)在          （填圖中標(biāo)號(hào)）階段發(fā)揮作用，同時(shí)      （填圖中標(biāo)號(hào)）階段還需要給予一定光照。

（7）從香蕉組織塊到獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉試管苗的過程中，需經(jīng)過        。(填數(shù)字)

①無絲分裂    ②有絲分裂   ③減數(shù)分裂   ④ 原代培養(yǎng)   ⑤ 傳代培養(yǎng)

⑥ 植物體細(xì)胞雜交   ⑦ 細(xì)胞融合     ⑧ 脫分化      ⑨ 再分化

下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述中正確的是

A．欲獲得人工種子，需培養(yǎng)至愈傷組織階段   

B．胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞的全能性比人的生發(fā)層細(xì)胞更容易表達(dá)出來

C．在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生在原代培養(yǎng)過程中     

D．脫分化過程主要是有絲分裂，僅有極少量細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂

（1）降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學(xué)機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補(bǔ)平，獲得雙鏈DNA，過程如下圖所示。在此過程中發(fā)現(xiàn)，合成較長的核苷酸單鏈易產(chǎn)生缺失堿基的現(xiàn)象。分析回答下列問題：

①上述制備該新型降鈣素，運(yùn)用的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是               。
②Klenow酶是一種           酶，合成的雙鏈DNA有           個(gè)堿基對(duì)。
③獲得的雙鏈DNA經(jīng)EcoRⅠ（識(shí)別序列和切割位點(diǎn)-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（識(shí)別序列和切割位點(diǎn)-G^↓GATCC-）雙酶切后插入到大腸桿菌質(zhì)粒中，篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌并進(jìn)行DNA測序驗(yàn)證。
A:設(shè)計(jì)EcoRⅠ和BamHⅠ雙酶切的目的是                                             。
B:要進(jìn)行重組質(zhì)粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有           。
④經(jīng)DNA測序表明，最初獲得的多個(gè)重組質(zhì)粒，均未發(fā)現(xiàn)完全正確的基因序列，最可能的原因是                                            。
(2)科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如下圖所示)，請結(jié)合圖示回答下列問題。

①在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分離，形成單個(gè)細(xì)胞，這個(gè)過程中需要利用________酶處理。
②形成重組細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用________期的卵母細(xì)胞，并去掉其細(xì)胞核的原因是____________
__________________________________。
③如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出_______和________等特點(diǎn)。
④在胚胎移植技術(shù)的基本程序中，沖卵以后，要對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)該發(fā)育到         或者囊胚階段。
⑤上圖中所示的生物技術(shù)包括有核移植、________、________等。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動(dòng)物________具有全能性。

（10分）植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用下圖所示圖解簡單表示：

（1）原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)包括細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、__________三部分構(gòu)成。

（2）培育胚狀體利用了________________技術(shù)。這一項(xiàng)生物技術(shù)，培養(yǎng)

基中除了含有一定的營養(yǎng)外，還必須含有植物激素，還需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的_____。

（3）獲得原生質(zhì)體后，需要對(duì)其活力進(jìn)行檢查，下列用哪些實(shí)驗(yàn)檢測最合適________。

A．觀察原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)是否完整     

B．觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)

C．觀察細(xì)胞有絲分裂            

D．觀察葉綠體數(shù)目的多少

（4）一般在培養(yǎng)基上培養(yǎng)24～48小時(shí)后，大部分原生質(zhì)體已再分生出細(xì)胞壁�？梢匀�樣，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通過_________實(shí)驗(yàn)來鑒別細(xì)胞壁是否已經(jīng)再生。

（5）愈傷組織再分化形成的胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng)，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了____  。

（6）從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過程中，需要經(jīng)過______         。

①無絲分裂     ②有絲分裂       ③減數(shù)分裂    ④原代培養(yǎng)  ⑤傳代培養(yǎng)

⑥植物體細(xì)胞雜交    ⑦細(xì)胞融合      ⑧脫分化      ⑨再分化

A．①④⑤⑦⑧       B. ②④⑤⑥⑧⑨    C．②⑧⑨       D．③⑥⑧⑨

（7）從圖解可知，需要在培養(yǎng)基中加入激素調(diào)整細(xì)胞分裂分化的是_______ （用字母a～e

回答）階段，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需培養(yǎng)到________。

（8）如果愈傷組織是棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，通過基因工程要獲取抗蟲棉，目的基因?qū)?/p>

入棉花愈傷組織細(xì)胞常用的方法是             法。