Question

（9分）CTAB法是一種從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA（總DNA）的技術(shù)。CTAB能跟核酸形成復(fù)合物，在高鹽溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在，當(dāng)降低溶液中鹽的濃度(＜0.3mol/L的 NaCl溶液)，CTAB - 核酸的復(fù)合物就會(huì)因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB；氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測(cè)水稻基因組DNA的操作步驟如下：
①在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中預(yù)熱；
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中，用液氮速凍并研磨成粉末，加入上述離心管中，于65℃水浴中保溫30min；
③取出離心管中，冷卻至室溫，加入20mL的氯仿，輕輕混勻20min；
④在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min；
⑤將上清液移入另一個(gè)離心管中，加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇，用玻璃棒輕輕攪動(dòng)，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復(fù)合物沉淀； 
⑥將沉淀移入另一個(gè)離心管中，加入70%乙醇洗滌，重復(fù)洗滌1-2次；
⑦吹干乙醇后，將DNA溶于適量的TE緩沖液中，在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在
核酸紫外檢測(cè)儀上觀察。
請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）植物基因組DNA（總DNA）的提取通常采用機(jī)械研磨的方法，常溫下研磨時(shí)，
植物細(xì)胞勻漿含有多種酶類(lèi)對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍，材料在研磨時(shí)易于破碎，同時(shí)還具有       的作用。
（2）實(shí)驗(yàn)步驟③、④的目的是       。
（3）實(shí)驗(yàn)步驟⑤中，玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是      。
（4）對(duì)DNA進(jìn)行定性檢測(cè)常用的試劑是          。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及           、    ，使帶電分子產(chǎn)生         
而實(shí)現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰，利用核酸紫外檢測(cè)儀可以進(jìn)行    。

Answer 1

（1）降低細(xì)胞勻漿中酶的活性，避免對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利影響（2分）（2）去除溶液中的蛋白質(zhì)（使蛋白質(zhì)變性和沉淀）（3）溶液中NaCl的濃度＜0.3mol/L，CTAB - 核酸的復(fù)合物因溶解度降低而沉淀（4）二苯胺    分子大小    形狀的不同    不同的遷移速度    DNA含量的測(cè)定（或檢測(cè)DNA）

解析