(8分)CTAB法是一種從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術(shù)。CTAB能跟核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當(dāng)降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的復(fù)合物就會(huì)因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測(cè)水稻基因組DNA的操作步驟如下:
① 在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預(yù)熱;
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;
③ 取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;
④ 在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min;
⑤ 將上清液移入另一個(gè)離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動(dòng),
小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復(fù)合物沉淀;
⑥ 將沉淀移入另一個(gè)離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復(fù)洗滌1-2次;
⑦ 吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測(cè)儀上觀察。
請(qǐng)回答下列問題:
(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機(jī)械研磨的方法,常溫下研磨時(shí),植物細(xì)胞勻漿含有多種酶類對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時(shí)易于破碎,同時(shí)還具有________________________________的作用。
(2)實(shí)驗(yàn)步驟③ 、④的目的是____________________。
(3)實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________。
(4)對(duì)DNA進(jìn)行定性檢測(cè)常用的試劑是_____。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及__________、__________,使帶電分子產(chǎn)生__________而實(shí)現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測(cè)儀可以進(jìn)行__________。

(8分)
(1)降低細(xì)胞勻漿中酶的活性,避免對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利影響
(2)去除溶液中的蛋白質(zhì)(使蛋白質(zhì)變性和沉淀)
(3)溶液中NaCl的濃度<0.3mol/L,CTAB - 核酸的復(fù)合物因溶解度降低而沉淀
(4)二苯胺    分子大小    形狀的不同    不同的遷移速度
DNA含量的測(cè)定(或檢測(cè)DNA)

解析

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源:2010年江蘇省清江中學(xué)高二第二學(xué)期期末考試生物試卷 題型:綜合題

(9分)CTAB法是一種從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術(shù)。CTAB能跟核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當(dāng)降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的復(fù)合物就會(huì)因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測(cè)水稻基因組DNA的操作步驟如下:
①在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預(yù)熱;
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;
③取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;
④在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min;
⑤將上清液移入另一個(gè)離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動(dòng),小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復(fù)合物沉淀; 
⑥將沉淀移入另一個(gè)離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復(fù)洗滌1-2次;
⑦吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在
核酸紫外檢測(cè)儀上觀察。
請(qǐng)回答下列問題:
(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機(jī)械研磨的方法,常溫下研磨時(shí),
植物細(xì)胞勻漿含有多種酶類對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時(shí)易于破碎,同時(shí)還具有       的作用。
(2)實(shí)驗(yàn)步驟③、④的目的是       。
(3)實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是      。
(4)對(duì)DNA進(jìn)行定性檢測(cè)常用的試劑是          。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及           、    ,使帶電分子產(chǎn)生         
而實(shí)現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測(cè)儀可以進(jìn)行    。

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科目:高中生物 來(lái)源:2010年江蘇省高二第二學(xué)期期末考試生物試卷 題型:綜合題

(9分)CTAB法是一種從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術(shù)。CTAB能跟核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當(dāng)降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的復(fù)合物就會(huì)因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測(cè)水稻基因組DNA的操作步驟如下:

①在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預(yù)熱;

②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;

③取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;

④在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min;

⑤將上清液移入另一個(gè)離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動(dòng),小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復(fù)合物沉淀; 

⑥將沉淀移入另一個(gè)離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復(fù)洗滌1-2次;

⑦吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在

核酸紫外檢測(cè)儀上觀察。

請(qǐng)回答下列問題:

(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機(jī)械研磨的方法,常溫下研磨時(shí),

植物細(xì)胞勻漿含有多種酶類對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時(shí)易于破碎,同時(shí)還具有        的作用。

(2)實(shí)驗(yàn)步驟③ 、④的目的是        。

(3)實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是       。

(4)對(duì)DNA進(jìn)行定性檢測(cè)常用的試劑是           。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及            、     ,使帶電分子產(chǎn)生         

而實(shí)現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測(cè)儀可以進(jìn)行     。

 

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科目:高中生物 來(lái)源:2010屆江蘇省蘇錫常鎮(zhèn)四市高三教學(xué)情況調(diào)查(二)生物試題 題型:綜合題

(8分)CTAB法是一種從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術(shù)。CTAB能跟核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當(dāng)降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的NaCl溶液),CTAB - 核酸的復(fù)合物就會(huì)因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測(cè)水稻基因組DNA的操作步驟如下:

① 在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預(yù)熱;

②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;

③ 取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;

④ 在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min;

⑤ 將上清液移入另一個(gè)離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動(dòng),

小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復(fù)合物沉淀;

⑥ 將沉淀移入另一個(gè)離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復(fù)洗滌1-2次;

⑦ 吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測(cè)儀上觀察。

請(qǐng)回答下列問題:

(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機(jī)械研磨的方法,常溫下研磨時(shí),植物細(xì)胞勻漿含有多種酶類對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時(shí)易于破碎,同時(shí)還具有________________________________的作用。

(2)實(shí)驗(yàn)步驟③ 、④的目的是____________________。

(3)實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________。

(4)對(duì)DNA進(jìn)行定性檢測(cè)常用的試劑是_____。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及__________、__________,使帶電分子產(chǎn)生__________而實(shí)現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測(cè)儀可以進(jìn)行__________。

 

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:閱讀理解

CTAB法是一種從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術(shù)。CTAB能跟核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液(>0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當(dāng)降低溶液中鹽的濃度(<0.3 mol/L的NaCl溶液)時(shí),CTAB-核酸的復(fù)合物就會(huì)因溶解度降低而沉淀,再用70%酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測(cè)水稻基因組DNA的操作步驟如下:

①在50 mL離心管中加入20 mL的CTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預(yù)熱;

②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30 min;

③取出離心管,冷卻至室溫,加入20 mL的氯仿,輕輕混勻20 min;

④在室溫下以12000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10~20 min;

⑤將上清液移入另一個(gè)離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動(dòng),小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB-核酸的復(fù)合物沉淀;

⑥將沉淀移入另一個(gè)離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復(fù)洗滌1~2次;

⑦吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測(cè)儀上觀察。

請(qǐng)回答下列問題:

(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機(jī)械研磨的方法,常溫下研磨時(shí),植物細(xì)胞勻漿中含有的多種酶會(huì)對(duì)DNA的提取產(chǎn)生不利影響。用液氮速凍,材料在研磨時(shí)易破碎,同時(shí)還具有_______________________________。

(2)實(shí)驗(yàn)步驟③、④的目的是________________________________。

(3)實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)對(duì)DNA進(jìn)行定性檢測(cè)常用的試劑是________,瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及________、________,使帶電分子產(chǎn)生________而實(shí)現(xiàn)分離。DNA在260 nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測(cè)儀可以進(jìn)行________。

 

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