(8分)CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術。CTAB能跟核酸形成復合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下:
① 在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預熱;
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;
③ 取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;
④ 在室溫下以 12000r/min的轉速離心10-20 min;
⑤ 將上清液移入另一個離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動,
小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀;
⑥ 將沉淀移入另一個離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復洗滌1-2次;
⑦ 吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測儀上觀察。
請回答下列問題:
(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機械研磨的方法,常溫下研磨時,植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時易于破碎,同時還具有________________________________的作用。
(2)實驗步驟③ 、④的目的是____________________。
(3)實驗步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________。
(4)對DNA進行定性檢測常用的試劑是_____。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及__________、__________,使帶電分子產(chǎn)生__________而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測儀可以進行__________。
科目:高中生物 來源:2010年江蘇省清江中學高二第二學期期末考試生物試卷 題型:綜合題
(9分)CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術。CTAB能跟核酸形成復合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下:
①在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預熱;
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;
③取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;
④在室溫下以 12000r/min的轉速離心10-20 min;
⑤將上清液移入另一個離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動,小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀;
⑥將沉淀移入另一個離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復洗滌1-2次;
⑦吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在
核酸紫外檢測儀上觀察。
請回答下列問題:
(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機械研磨的方法,常溫下研磨時,
植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時易于破碎,同時還具有 的作用。
(2)實驗步驟③、④的目的是 。
(3)實驗步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是 。
(4)對DNA進行定性檢測常用的試劑是 。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及 、 ,使帶電分子產(chǎn)生
而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測儀可以進行 。
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科目:高中生物 來源:2010年江蘇省高二第二學期期末考試生物試卷 題型:綜合題
(9分)CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術。CTAB能跟核酸形成復合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下:
①在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預熱;
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;
③取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;
④在室溫下以 12000r/min的轉速離心10-20 min;
⑤將上清液移入另一個離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動,小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀;
⑥將沉淀移入另一個離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復洗滌1-2次;
⑦吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在
核酸紫外檢測儀上觀察。
請回答下列問題:
(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機械研磨的方法,常溫下研磨時,
植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時易于破碎,同時還具有 的作用。
(2)實驗步驟③ 、④的目的是 。
(3)實驗步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是 。
(4)對DNA進行定性檢測常用的試劑是 。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及 、 ,使帶電分子產(chǎn)生
而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測儀可以進行 。
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科目:高中生物 來源:2010屆江蘇省蘇錫常鎮(zhèn)四市高三教學情況調查(二)生物試題 題型:綜合題
(8分)CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術。CTAB能跟核酸形成復合物,在高鹽溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當降低溶液中鹽的濃度(<0.3mol/L的NaCl溶液),CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下:
① 在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預熱;
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30min;
③ 取出離心管中,冷卻至室溫,加入20mL的氯仿,輕輕混勻20min;
④ 在室溫下以 12000r/min的轉速離心10-20 min;
⑤ 將上清液移入另一個離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動,
小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀;
⑥ 將沉淀移入另一個離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復洗滌1-2次;
⑦ 吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測儀上觀察。
請回答下列問題:
(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機械研磨的方法,常溫下研磨時,植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍,材料在研磨時易于破碎,同時還具有________________________________的作用。
(2)實驗步驟③ 、④的目的是____________________。
(3)實驗步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________。
(4)對DNA進行定性檢測常用的試劑是_____。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及__________、__________,使帶電分子產(chǎn)生__________而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測儀可以進行__________。
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術。CTAB能跟核酸形成復合物,在高鹽溶液(>0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,當降低溶液中鹽的濃度(<0.3 mol/L的NaCl溶液)時,CTAB-核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀,再用70%酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下:
①在50 mL離心管中加入20 mL的CTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中預熱;
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65℃水浴中保溫30 min;
③取出離心管,冷卻至室溫,加入20 mL的氯仿,輕輕混勻20 min;
④在室溫下以12000 r/min的轉速離心10~20 min;
⑤將上清液移入另一個離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動,小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB-核酸的復合物沉淀;
⑥將沉淀移入另一個離心管中,加入70%乙醇洗滌,重復洗滌1~2次;
⑦吹干乙醇后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測儀上觀察。
請回答下列問題:
(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機械研磨的方法,常溫下研磨時,植物細胞勻漿中含有的多種酶會對DNA的提取產(chǎn)生不利影響。用液氮速凍,材料在研磨時易破碎,同時還具有_______________________________。
(2)實驗步驟③、④的目的是________________________________。
(3)實驗步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)對DNA進行定性檢測常用的試劑是________,瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及________、________,使帶電分子產(chǎn)生________而實現(xiàn)分離。DNA在260 nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測儀可以進行________。
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