Question

5．如圖是利用基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得新植株的過程，請回答：

（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒分布在細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，它的特點(diǎn)是可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因?yàn)樗�含有控制合成限制酶和DNA連接酶的基因．
（2）C→D過程，需要使用Ca²⁺處理，使D處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)．
（3）從E到表現(xiàn)出新性狀的植物，需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)．此技術(shù)一般用固體培養(yǎng)基．在此培養(yǎng)過程中，要求無菌操作的原因是：一方面雜菌的生長會與目標(biāo)培養(yǎng)物競爭營養(yǎng)，從而使其失去營養(yǎng)；另一方面雜菌會大量產(chǎn)生對目標(biāo)培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致目標(biāo)培養(yǎng)物不能正常生長發(fā)育甚至死亡．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、分析題圖：A是質(zhì)粒，B是目的基因，C是基因表達(dá)載體，D是農(nóng)桿菌細(xì)胞，E是受體細(xì)胞．

解答 解：（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒分布在細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，由于該DNA含有控制合成 限制酶和 DNA連接酶的基因，因此該DNA可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．
（2）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即常用Ca²⁺處理微生物細(xì)胞，使其成為能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞．
（3）從E到表現(xiàn)出新性狀的植物，需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)．該技術(shù)一般用固體培養(yǎng)基．在此培養(yǎng)過程中，要求無菌操作的原因是：一方面雜菌的生長會與目標(biāo)培養(yǎng)物競爭營養(yǎng)，從而使其失去營養(yǎng)；另一方面雜菌會大量產(chǎn)生對目標(biāo)培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致目標(biāo)培養(yǎng)物不能正常生長發(fā)育甚至死亡．
故答案為：
（1）細(xì)胞質(zhì)    T-DNA    可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上
限制酶     DNA連接酶
（2）Ca²⁺       吸收周圍環(huán)境中DNA分子
（3）植物組織培養(yǎng)     固體
競爭營養(yǎng)，從而使其失去營養(yǎng)         有害的物質(zhì)，導(dǎo)致目標(biāo)培養(yǎng)物不能正常生長發(fā)育甚至死亡

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題；識記植物組織培養(yǎng)過程，掌握植物組織培養(yǎng)的條件，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．