Question

14．生活飲用水巳經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當其水源水不潔或處理達不到要求時，仍然會含相當量的微生物甚至含有致病性微生物．供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導致生活飲用水的污染．因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的．我國生活飲用水水質標準（GB5749-85）中規(guī)定生活飲用水中細菌總數(shù)不得大于100個/mL，總大腸菌群不得大于3個/L．
（1）檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為稀釋涂布平板法．
（2）用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設置對照組？需要為什么？因為需要判斷培養(yǎng)基是否被污染
（3）如分別取0.1mL已稀釋10²倍的水樣分別涂布到四個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為1.61×10⁸．
（4）純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可（可/不可）用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
（5）如圖表示培養(yǎng)和純化X細菌的部分操作步驟，下列相關敘述正確的是C．

A．步驟①倒平板操作時，倒好后應立即將其倒過來放置
B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速沾取菌液后平板劃線
C．步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落
D．步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對X細菌進行計數(shù)
（6）下列有關微生物培養(yǎng)的敘述錯誤的是A．
A．在對微生物進行培養(yǎng)前，需要對微生物和培養(yǎng)基進行滅菌
B．分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源
C．測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法進行菌落計數(shù)
D．酵母菌發(fā)酵過程產(chǎn)生的酒精，對其他微生物生長有一定的抑制作用．

Answer 1

分析 稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞．
計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)．此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)．

解答 解：（1）對微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進行接種，但稀釋涂布平板法適用于微生物的計數(shù)．
（2）由于需要判斷培養(yǎng)基是否被污染，所以用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要設置對照組．
（3）每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為：（161+155+158+170）÷4×1000×10³=1.61×10⁸個．
（4）純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
（5）據(jù)圖示可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)．
A、倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，A錯誤；
B、步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以沾取菌液后平板劃線，B錯誤；
C、步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落，C正確；
D、步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對X細菌進行分離得到純種，D錯誤．
故選：C．
（6）A、在對微生物進行培養(yǎng)前，需要對除微生物外的培養(yǎng)基和所有用具進行滅菌或消毒，A錯誤；
B、篩選尿素分解菌需要使用以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源的選擇培養(yǎng)基，B正確；
C、測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法進行菌落計數(shù)，C正確；
D、酒精具有殺菌和抑菌作用，酵母菌發(fā)酵過程產(chǎn)生的酒精，對其他微生物生長有一定的抑制作用，D正確．
故選：A．．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法
（2）需要    因為需要判斷培養(yǎng)基是否被污染
（3）1.61×10⁸
（4）高壓蒸汽滅菌    不可
（5）C
（6）A

點評 本題旨在考查微生物的分離和培養(yǎng)、某種微生物數(shù)量的測定和培養(yǎng)基對微生物的選擇利用，意在考查具備驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析和處理，具有對一些生物學問題進行初步探究的能力．