Question

18．炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病．對炭疽病疑似患者，可通過噬菌體裂解實(shí)驗確診．

（1）為從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，將采集到的患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用涂布器涂勻，這種接種方法稱為稀釋涂布平板法．
（2）用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要對照組？需要．為什么？因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染．
（3）如圖為細(xì)菌鑒定的實(shí)驗流程．圖中III的液體培養(yǎng)基由澄清變渾濁的原因是細(xì)菌大量繁殖．在實(shí)驗Ⅳ中，先用無菌滴管吸取實(shí)驗Ⅲ中的培養(yǎng)物滴于平板培養(yǎng)基表面，再用涂布器涂勻，經(jīng)培養(yǎng)得到如圖中Ⅳ的6個菌落．然后在平板培養(yǎng)基的④⑤⑥或①②③（填數(shù)字標(biāo)號）菌落上滴加含噬菌體液體．觀察并記錄結(jié)果．
（4）用炭疽桿菌進(jìn)行實(shí)驗后，所有用過的培養(yǎng)液、培養(yǎng)基等必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散，污染環(huán)境．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的基本成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；
2、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；
3、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法．
4、微生物實(shí)驗室分離中配制培養(yǎng)基的操作步驟：計算→稱量→溶解→調(diào)pH→滅菌步驟．
5、培養(yǎng)基的分類有按物理性質(zhì)分有固體、半固體、液體培養(yǎng)基；按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．

解答 解：（1）根據(jù)題干信息可知該方法為稀釋涂布平板法．
（2）因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，因此需要設(shè)置不接種細(xì)菌的空白平板作對照．
（3）細(xì)菌大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁．若可疑菌落是炭疽桿菌，可被專門寄生在炭疽桿菌體內(nèi)的噬菌體侵入并溶解．
（4）微生物培養(yǎng)實(shí)驗后，所有用過的培養(yǎng)液、培養(yǎng)基等必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散，污染環(huán)境．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法  
（2）需要   因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）   
（3）細(xì)菌大量繁殖  實(shí)驗Ⅲ中的培養(yǎng)物  ④⑤⑥或①②③含噬菌體液體   
（4）滅菌

點(diǎn)評 本題考查了微生物的培養(yǎng)中相關(guān)的實(shí)驗方法、實(shí)驗設(shè)計和分析，難度不大，符合高考要求．高考對選修一的考查難度不大，注重對實(shí)驗的基本操作方法的考查．預(yù)計2015年高考仍將集中在微生物的利用、PCR技術(shù)以及植物組織培養(yǎng)等方面．