Question

【題目】請(qǐng)回答微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的有關(guān)問題

尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但是，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某研究人員嘗試從土壤中對(duì)分解尿素的微生物進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)。

【1】分解尿素的微生物中含有的酶是______________；為篩選出能分解尿素的微生物，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以______________作為唯一氮源，因此該培養(yǎng)基屬于______________培養(yǎng)基。

【2】該培養(yǎng)基在接種前應(yīng)該用______________法滅菌。

【3】對(duì)初步篩選得到的分解尿素的微生物進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是____________________________。在接種前，隨機(jī)取若干菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是__________________________________________。

Answer 1

【答案】

【1】 脲酶 尿素 選擇

【2】高壓蒸汽滅菌法

【3】 稀釋涂布平板法 檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格

【解析】

本題主要考查微生物的篩選與分離，尿素分解菌的篩選等知識(shí)。從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選尿素分解菌應(yīng)該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，配制培養(yǎng)基的一般操作是配制培養(yǎng)液、調(diào)整pH、分裝、包扎、滅菌、擱置斜面。微生物的計(jì)數(shù)常用稀釋涂布平板法接種，采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，要將培養(yǎng)皿倒置。

【1】尿素分解菌能夠合成脲酶，脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘焙投�氧化碳。篩選尿素分解菌需要使用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。

【2】培養(yǎng)基需要使用高壓蒸汽滅菌法滅菌。

【3】微生物計(jì)數(shù)通常使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法屬于活菌計(jì)數(shù)法。檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格，需要將滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，如果沒有菌落產(chǎn)生，那么培養(yǎng)基滅菌合格，否則不合格。

培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。