Question

【題目】【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】

毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)山羊的簡單流程如下圖所示：

（1）在①過程中構(gòu)建的KIFⅡ基因表達(dá)載體時(shí)，最常用的運(yùn)載工具是__________；構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體上，目的基因應(yīng)插入__________和__________之間，以便成功表達(dá)。

（2）從基因文庫中獲得的KIFⅡ基因可用______技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，其原理是______________。

（3）通過②過程形成的成纖維細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，將其置于含95%空氣加__________的混合氣體培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)中加入__________達(dá)到無菌環(huán)境。

（4）通過④過程獲得的卵（母）細(xì)胞，在與成纖維細(xì)胞形成重組細(xì)胞前，應(yīng)先通過顯微操作去掉__________。

Answer 1

【答案】 質(zhì)粒 啟動子 終止子 PCR DNA雙鏈復(fù)制 5%CO2 抗生素 細(xì)胞核

【解析】試題分析：①圖中為構(gòu)建基因表達(dá)載體，②為用胰蛋白酶處理動物組織使其分散成單個(gè)細(xì)胞，③為獲取成熟的去核卵母細(xì)胞，之后通過把含目的基因的受體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞獲得重組細(xì)胞，再經(jīng)過早期胚胎的培育至桑葚胚或囊胚，通過胚胎移植到代孕母羊的子宮內(nèi)，繼續(xù)發(fā)育，直至分娩出轉(zhuǎn)基因絨三羊。

（1）基因工程中，運(yùn)載工具包括質(zhì)粒、噬菌體及動植物病毒等，其中質(zhì)粒是最常用的運(yùn)載工具。目的基因要能成功表達(dá)，上游必需有啟動子，下游必需有終止子，所以構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)將目的基因插在啟動子和終止子之間。

（2）擴(kuò)增從基因文庫中獲得的KIFⅡ基因，可用PCR技術(shù)進(jìn)行，其原理是 DNA雙鏈復(fù)制。

（3）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為維持培養(yǎng)液的PH值，往往加入5% CO2。培養(yǎng)中為了抑制雜菌的污染，常常應(yīng)加入一定量的抗生素。

（4）成熟卵(母)細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要來自于供體核。