Question

18．紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂和CO₂，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白．請回答下列有關問題：
（1）血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
（2）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液．
①加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固．
②以上所述的過程即是樣品處理，它包括紅細胞的洗滌、進行純度鑒定、分離血紅蛋白溶液．
（3）收集的血紅蛋白溶液要進行粗分離，其方法是血紅蛋白的釋放．
（4）然后通過法將樣品純化，樣品純化的目的是透析、凝膠色譜去除大分子雜質蛋白．最后經SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳進行純度鑒定．
（5）電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子的大小、形狀的不同，使帶電分子產生不同的遷移速率，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離．

Answer 1

分析 血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定．
樣品處理包括四個步驟，即紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析．
透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以讓小分子可以自由進出，而大分子不能通過．
樣品純化的目的是通過凝膠色譜法將相對分子質量大的蛋白質除去．

解答 解：（1）血紅蛋白的提取和分離一般分為4步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
（2）①采取血液時要在采血容器中預先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固．
②樣品處理又包括紅細胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析4步．
（3）①透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜蛋白．
②透析的原理是透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內．
（4）樣品的純化是通過膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去，最后經SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳進行純度鑒定．
（5）電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子本身的大小、形狀的不同的不同，使帶電分子產生不同的遷移速率，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離．
故答案為：
（1）樣品處理  純化  純度鑒定
（2）①防止血液凝固
②血紅蛋白的釋放
（3）透析
（4）凝膠色譜去除大分子雜質蛋白      SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳
（5）大小

點評 本題難度一般，要求考生能夠識記蛋白質的提取和分離的相關知識，考查學生對蛋白質的提取和分離實驗操作步驟的識記和理解．