Question

14．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但尿素只有通過土壤中某些細(xì)菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？不能（能/不能），原因是培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物．
（2）要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目（平均菌落數(shù)）就能大約推測出樣品中活菌數(shù)．常用的微生物接種方法還有平板劃線法，此接種法在做第二次以及其后的劃線操作時總是從上次劃線的末端開始劃線的原因是將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個細(xì)胞繁殖而來的菌落．
（3）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基的概念是：在微生物學(xué)中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，由于分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無法生長．
2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，獲得由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落．

解答 解：（1）由圖中培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基中，能提供氮源的是蛋白胨和尿素，不能利用尿素的菌可以以蛋白胨為氮源生長，所以不能分離出分解尿素的菌．
（2）微生物常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，由于圖涂布平板時，可以確定涂布的體積，因此要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法進行接種；根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的平均菌落數(shù)，進而推出出樣品中活菌數(shù)．平板劃線法時，第一次灼燒接種環(huán)的目的是殺滅雜菌，在做第二次以及其后的劃線操作時總是從上次劃線的末端開始劃線的目的是 將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個細(xì)胞繁殖而來的菌落．
（3）實驗結(jié)束后，為防止培養(yǎng)的微生物污染環(huán)境，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌．
故答案為：
（1）不能　      培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物
（2）稀釋涂布平板     菌落數(shù)目（平均菌落數(shù)）    平板劃線法    將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個細(xì)胞繁殖而來的菌落
（3）滅菌

點評 本題旨在考查學(xué)生對選擇培養(yǎng)基的選擇作用、稀釋涂布平板法和平板劃線法接種微生物、微生物培養(yǎng)的無菌操作等技術(shù)的熟練掌握和應(yīng)用．