Question

豬的基因和人類的基因存在一定的相似度．據(jù)報道經(jīng)特殊處理的豬皮可在人體上存活3周左右，起保護創(chuàng)面免受感染的作用．為了使移植的豬皮存活更長時間，有人設(shè)法導(dǎo)入人的相關(guān)基因（用P表示），獲得轉(zhuǎn)基因小白豬．其簡要流程圖如圖所示：

請據(jù)圖回答：
（1）過程①中用到的工具酶是

 

，將目的基因?qū)�入成纖維細(xì)胞常用的方法是

 

．
（2）過程②中，常用

 

酶處理，將皮膚組織塊分三次單個成纖維細(xì)胞．在培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時需要滿足的條件是通氣、適宜的溫度、pH、營養(yǎng)物質(zhì)以及

 

環(huán)境．
（3）過程③中，用

 

處理以獲取更多的卵（母）細(xì)胞，其在體外需培養(yǎng)到

 

期再通過顯微操作進行去核處理．
（4）過程中所用的技術(shù)是

 

；圖中“早期胚胎”移植到代孕母豬子宮內(nèi)時通常需要培養(yǎng)到

 

期．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：根據(jù)圖示，可知①是基因表載體的構(gòu)建、②是動物細(xì)胞培養(yǎng)、③是早期胚胎培養(yǎng)．成纖維細(xì)胞是動物細(xì)胞，常用顯微注射法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．通過核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞，首先對供體用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵；另需要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才可以去核．在進行胚胎移植時，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，此時全能性較高，易于分裂和發(fā)育．動物細(xì)胞培養(yǎng)基含有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)，另外需要無菌和無毒的環(huán)境．

解答： 解：（1）在構(gòu)建表達載體時，要用同一種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，使質(zhì)粒和目的基因產(chǎn)生相同的末端，再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒．受體細(xì)胞是動物細(xì)胞，可以通過顯微注射法將目的基因轉(zhuǎn)化入受體細(xì)胞．
（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)時，取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞．動物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒的環(huán)境、營養(yǎng)物質(zhì)充沛、適宜的溫度和PH、氣體環(huán)境等條件．
（3）對供體用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，獲取更多的卵母細(xì)胞．去核的卵細(xì)胞，需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才可以去核．
（4）在進行胚胎移植時，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，此時全能性較高，易于分裂和發(fā)育．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶      顯微注射法
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）     無菌、無毒
（3）促性腺激素      減數(shù)第二次分裂中（或MⅡ中期）
（4）（早期）胚胎培養(yǎng)     桑椹胚或囊胚

點評：本題綜合考查了細(xì)胞工程、胚胎工程和基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實際，綜合運用所學(xué)知識解決自然界和社會生活中的一些生物學(xué)問題的能力．