Question

12．白血病是由于造血干細胞增殖分化異常而引起的惡性增殖性疾�。�目前治療白血病的主要方法是骨髓移植，但骨髓配型的成功率較低，大大限制了白血病的治療．隨著基因工程的日漸興起，迎來了基因治療白血病的曙光．請回答下列相關(guān)問題：
（1）骨髓移植必須進行骨髓配型實驗，原因是防止發(fā)生過強的免疫排斥反應(yīng)．目前，臨床上通常通過使用免疫抑制劑來提高造血干細胞移植的成活率．
（2）造血干細胞移植之前先要進行培養(yǎng)．動物細胞培養(yǎng)一般分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個階段．對于培養(yǎng)的環(huán)境條件，除需要適宜的溫度、無菌無毒等以外，還要向培養(yǎng)液中通人氧氣和二氧化碳，通人氧氣的目的是保證細胞能夠進行有氧呼吸，通人二氧化碳的目的是維持培養(yǎng)液的pH；對子所用的培養(yǎng)液，應(yīng)定期更換，其目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害．
（3）在進行細胞移植前，有時需對移植的細胞進行基因改造．要了解基因改造是否成功，可在分子水平上檢測是否翻譯成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，常用的方法是抗原一抗體雜交法．
（4）上述使用的正常細胞，通常為10代以內(nèi)，以保持細胞正常的二倍體核型．
（5）哺乳動物的胚胎干細胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，可以在體外被誘導(dǎo)分化形成新的組織細胞，這使科學(xué)家進一步培育人造骨髓成為可能．

Answer 1

分析 1、原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原代細胞．初次培養(yǎng)稱為原代細胞培養(yǎng)．
2、傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)．
3、動物細胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
4、胚胎干細胞
（1）哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來．
（2）具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞．另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造．
（3）胚胎干細胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；
②是在體外條件下研究細胞分化的理想材料，在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時，就可以誘導(dǎo)ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡的機理提供了有效的手段；
③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、少年糖尿病等；
④利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細胞的特性，移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能；
⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過ES細胞體外誘導(dǎo)分化，定向培育出人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題．

解答 解：（1）骨髓移植必須進行骨髓配型實驗，原因是防止發(fā)生過強的免疫排斥反應(yīng)．目前，臨床上通常通過使用免疫抑制劑來提高造血干細胞移植的成活率．
（2）動物細胞培養(yǎng)一般分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個階段．對于培養(yǎng)的環(huán)境條件，除需要適宜的溫度、無菌無毒等以外，還要向培養(yǎng)液中通人氧氣和二氧化碳，通人氧氣的目的是保證細胞能夠進行有氧呼吸，通人二氧化碳的目的是維持培養(yǎng)液的pH；對子所用的培養(yǎng)液，應(yīng)定期更換，其目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害．
（3）在分子水平上檢測是否翻譯成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，常用抗原一抗體雜交法．
（4）上述使用的正常細胞，通常為10代以內(nèi)，以保持細胞正常的二倍體核型．
（5）哺乳動物的胚胎干細胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，具有發(fā)育的全能性，可以在體外被誘導(dǎo)分化形成新的組織細胞，這使科學(xué)家進一步培育人造骨髓成為可能．
故答案為：
（1）防止發(fā)生過強的免疫排斥反應(yīng)   免疫抑制劑
（2）原代培養(yǎng)  傳代培養(yǎng)   保證細胞能夠進行有氧呼吸    維持培養(yǎng)液的pH    清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害
（3）抗原一抗體雜交法
（4）10
（5）早期胚胎或原始性腺    分化

點評 本題考查動物細胞培養(yǎng)、胚胎干細胞等知識，要求考生識記動物細胞培養(yǎng)的類型、條件等基礎(chǔ)知識；識記胚胎干細胞的來源、特點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題．