Question

【題目】人乳頭狀瘤病毒（HPV）與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）單克隆抗體制備過(guò)程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有________________。

（2）將經(jīng)融合處理后的細(xì)胞轉(zhuǎn)到HAT接著基上培養(yǎng)的目的是 ，該細(xì)胞 （填“能”、“不能”）產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體，所產(chǎn)生的抗體 （填“一定”、“不一定”）能抗HPV。

（3）對(duì)于抗體檢測(cè)呈______性的雜交瘤細(xì)胞克隆應(yīng)進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，克隆化培養(yǎng)的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液______mL（填“0．1”、“1”或“10”），使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。

（4）科學(xué)家從某些無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外，請(qǐng)?jiān)俸?jiǎn)要寫(xiě)出一種制備單克隆抗體的思路____________________。

Answer 1

【答案】（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合

（2）篩選出雜交瘤細(xì)胞 能 不一定

（3）陽(yáng) 0．1

（4）通過(guò)基因工程向效應(yīng)B細(xì)胞中導(dǎo)入prG或利用核移植技術(shù)將效應(yīng)B細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無(wú)限增殖細(xì)胞中（答對(duì)其一即可）

【解析】（1）骨髓瘤細(xì)胞和某些淋巴細(xì)胞在融合前需借助動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行培養(yǎng)，融合時(shí)采用的技術(shù)手段是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。

（2）將骨髓瘤細(xì)胞和某些淋巴細(xì)胞混合并進(jìn)行融合、轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基上培養(yǎng)的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞能產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體。因所有的雜交瘤細(xì)胞在HAT接著基上都能生長(zhǎng)增殖，因此篩選出的雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體不一定能抗HPV。

（3）抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體才是抗HPV的抗體，因此對(duì)于此類(lèi)細(xì)胞需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，克隆化培養(yǎng)的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液0．1 mL，使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。

（4）抗體是由效應(yīng)B細(xì)胞合成分泌的。利用無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG）制備單克隆抗體，可以借助基因工程技術(shù)，其思路是：通過(guò)基因工程向效應(yīng)B細(xì)胞中導(dǎo)入prG；也可以借助核移植技術(shù)，其思路是：利用核移植技術(shù)將效應(yīng)B細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無(wú)限增殖細(xì)胞中。