Question

研究人員將魚的抗凍基因導入番茄體內，獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種．下列操作合理的是（　　）

• A、設計相應DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術擴增目的基因
• B、利用限制酶和DNA聚合酶構建基因表達載體
• C、將基因表達載體導入番茄細胞之前需用Ca²⁺處理細胞
• D、運用DNA分子雜交技術檢測抗凍基因是否在番茄細胞中表達

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：基因工程技術的基本步驟：
1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．3、將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：A、獲取抗凍基因時，可設計相應DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術擴增目的基因，A正確；
B、利用限制酶和DNA連接酶構建基因表達載體，B錯誤；
C、將基因表達載體導入番茄細胞的方法有基因槍法、花粉管通道法、農桿菌轉化法，這三種方法都不需用Ca²⁺處理細胞，C錯誤；
D、運用DNA分子雜交技術檢測抗凍基因是否導入番茄細胞中，但不能檢測抗凍基因是否在番茄細胞中表達，D錯誤．
故選：A．

點評：本題考查基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應用，能運用所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．