Question

研究人員將魚的抗凍基因?qū)�入番茄體內(nèi)，獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種．下列操作合理的是（　�。�

• A、設(shè)計相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術(shù)擴增目的基因
• B、利用限制酶和DNA聚合酶構(gòu)建基因表達載體
• C、將基因表達載體導(dǎo)入番茄細胞之前需用Ca²⁺處理細胞
• D、運用DNA分子雜交技術(shù)檢測抗凍基因是否在番茄細胞中表達

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
2、基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．3、將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：A、獲取抗凍基因時，可設(shè)計相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術(shù)擴增目的基因，A正確；
B、利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達載體，B錯誤；
C、將基因表達載體導(dǎo)入番茄細胞的方法有基因槍法、花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這三種方法都不需用Ca²⁺處理細胞，C錯誤；
D、運用DNA分子雜交技術(shù)檢測抗凍基因是否導(dǎo)入番茄細胞中，但不能檢測抗凍基因是否在番茄細胞中表達，D錯誤．
故選：A．

點評：本題考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應(yīng)用，能運用所學(xué)的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．