Question

【題目】2，4，6-三氯酚主要通過農(nóng)藥施放、污水灌溉進(jìn)入土壤造成環(huán)境污染，對人類有很強(qiáng)的致畸、致癌和致突變作用。由于氯代酚類物具有很強(qiáng)的毒性，所以對于被2，4，6-三氯酚污染的土壤僅利用土著微生物進(jìn)行降解非常困難。常采用投加具有高效降解此類有機(jī)物的菌種以強(qiáng)化和補(bǔ)充土著微生物數(shù)量不足的問題。

（1）為獲得高效降解菌，某科研機(jī)構(gòu)選取適量農(nóng)田土壤，加以_______________為唯一碳源進(jìn)行為期4個月的菌種培養(yǎng)和馴化。馴化期間，每周需要輕輕翻動一次土壤，其目的是_______________________________________。

（2）馴化結(jié)束后，將菌種土壤加___________配制成土壤溶液，合理處理后加入配制好的選擇培養(yǎng)基中，37℃條件下培養(yǎng)7d，再將培養(yǎng)基中菌落在無菌條件下用接種環(huán)挑取至50 mL的_______培養(yǎng)基中（按物理性質(zhì)分類）進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是__________________。

（3）為解決因為外界環(huán)境因素（如濕度、光照等）使菌種無法發(fā)揮降解作用的難題。科研機(jī)構(gòu)做了以下操作：

①取少量菌液，加入2．5％的海藻酸鈉溶液，將菌液與海藻酸鈉溶液按體積比1：3配制成混合液。

②充分混勻后，用注射針頭吸取混合液滴入一定質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4％的______溶液中，形成半透明小球。

③取出后用甘露醇溶液沖洗兩次后保存于滅菌袋中，備用。

（4）上述技術(shù)是_____________，該技術(shù)既可以使高效降解菌保持活性，反復(fù)使用，又能提高微生物的催化活性和污染物降解速率。如果所使用的海藻酸鈉濃度過高，則會導(dǎo)致__________。

Answer 1

【答案】2，4，6-三氯酚 補(bǔ)充氧氣，同時讓培養(yǎng)的微生物充分接觸營養(yǎng)物質(zhì) 無菌水 液體 增加2，4，6-三氯酚降解菌濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的菌種 CaCl2 固定化細(xì)胞技術(shù) 難形成半透明小球

【解析】

由題可知2，4，6-三氯酚降解菌分離主要步驟：土壤取樣（富含2，4，6-三氯酚土壤）→選擇培養(yǎng)（增大降解菌含量）→涂布培養(yǎng)（鑒別）→純化培養(yǎng)（分離出降解菌）。固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)的方法將細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)。

（1）投放具有高效降解2，4，6-三氯酚的菌種，應(yīng)以2，4，6-三氯酚為唯一碳源。定期翻動土壤的目的是補(bǔ)充氧氣，同時讓微生物充分接觸營養(yǎng)物質(zhì)。

（2）菌種土壤加無菌水配制成土壤溶液；50mL的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，選擇培培養(yǎng)目的是增加2，4，6-三氯酚降解菌濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的菌種。

（3）用注射針頭吸取混合液滴入4%的CaCl2溶液使膠體聚沉，形成穩(wěn)定的半透明小球。

（4）將菌種包埋在海藻酸鈉中的技術(shù)是固定化細(xì)胞技術(shù)。如果所使用的海藻酸鈉濃度過高，則容易出現(xiàn)拖尾狀的凝膠珠，如果所使用的海藻酸鈉濃度過低，則形成的半透明小球所包埋的菌種數(shù)量過少。