Question

【題目】2，4，6-三氯酚主要通過農藥施放、污水灌溉進入土壤造成環(huán)境污染，對人類有很強的致畸、致癌和致突變作用。由于氯代酚類物具有很強的毒性，所以對于被2，4，6-三氯酚污染的土壤僅利用土著微生物進行降解非常困難。常采用投加具有高效降解此類有機物的菌種以強化和補充土著微生物數量不足的問題。

（1）為獲得高效降解菌，某科研機構選取適量農田土壤，加以_______________為唯一碳源進行為期4個月的菌種培養(yǎng)和馴化。馴化期間，每周需要輕輕翻動一次土壤，其目的是_______________________________________。

（2）馴化結束后，將菌種土壤加___________配制成土壤溶液，合理處理后加入配制好的選擇培養(yǎng)基中，37℃條件下培養(yǎng)7d，再將培養(yǎng)基中菌落在無菌條件下用接種環(huán)挑取至50 mL的_______培養(yǎng)基中（按物理性質分類）進行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是__________________。

（3）為解決因為外界環(huán)境因素（如濕度、光照等）使菌種無法發(fā)揮降解作用的難題�？蒲袡C構做了以下操作：

①取少量菌液，加入2．5％的海藻酸鈉溶液，將菌液與海藻酸鈉溶液按體積比1：3配制成混合液。

②充分混勻后，用注射針頭吸取混合液滴入一定質量分數為4％的______溶液中，形成半透明小球。

③取出后用甘露醇溶液沖洗兩次后保存于滅菌袋中，備用。

（4）上述技術是_____________，該技術既可以使高效降解菌保持活性，反復使用，又能提高微生物的催化活性和污染物降解速率。如果所使用的海藻酸鈉濃度過高，則會導致__________。

Answer 1

【答案】2，4，6-三氯酚 補充氧氣，同時讓培養(yǎng)的微生物充分接觸營養(yǎng)物質 無菌水 液體 增加2，4，6-三氯酚降解菌濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的菌種 CaCl2 固定化細胞技術 難形成半透明小球

【解析】

由題可知2，4，6-三氯酚降解菌分離主要步驟：土壤取樣（富含2，4，6-三氯酚土壤）→選擇培養(yǎng)（增大降解菌含量）→涂布培養(yǎng)（鑒別）→純化培養(yǎng)（分離出降解菌）。固定化細胞技術是利用物理或化學的方法將細胞固定在一定空間內的技術。

（1）投放具有高效降解2，4，6-三氯酚的菌種，應以2，4，6-三氯酚為唯一碳源。定期翻動土壤的目的是補充氧氣，同時讓微生物充分接觸營養(yǎng)物質。

（2）菌種土壤加無菌水配制成土壤溶液；50mL的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，選擇培培養(yǎng)目的是增加2，4，6-三氯酚降解菌濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的菌種。

（3）用注射針頭吸取混合液滴入4%的CaCl2溶液使膠體聚沉，形成穩(wěn)定的半透明小球。

（4）將菌種包埋在海藻酸鈉中的技術是固定化細胞技術。如果所使用的海藻酸鈉濃度過高，則容易出現(xiàn)拖尾狀的凝膠珠，如果所使用的海藻酸鈉濃度過低，則形成的半透明小球所包埋的菌種數量過少。