Question

（15分）人和哺乳動(dòng)物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。土壤中有些細(xì)菌含有脲酶，可通過(guò)降解尿素作為其生長(zhǎng)的氮源。現(xiàn)對(duì)土壤中的這類(lèi)細(xì)菌進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無(wú)菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無(wú)菌的，常用的滅菌方法有 (至少答2種)。

（2）將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過(guò)程中每一步都要在 旁進(jìn)行操作。接種后的培養(yǎng)皿 于37℃的 中培養(yǎng)。

（3）用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細(xì)菌，其菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的 使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力 。

（4）與全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù) 。

A．多 B．少 C．相等 D．幾乎為零

Answer 1

（1）高壓蒸汽滅菌 灼燒滅菌 干熱滅菌 (2)酒精燈火焰旁 倒置 恒溫培養(yǎng)箱 (3)選擇 氨 越強(qiáng) (4) B

【解析】

試題分析：（1）常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌、干熱滅菌。

（2）在稀釋土壤溶液的過(guò)程中每一步都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作，避免周?chē)�環(huán)境微生物的污染。接種后的培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)能夠防止凝結(jié)在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面導(dǎo)致染菌，還有利于菌種利用培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)，加快生長(zhǎng)速度。37℃恒溫有利菌種生長(zhǎng)。

（3）含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌，為選擇培養(yǎng)基。分解尿素的細(xì)菌能夠?qū)⒛蛩胤纸猱a(chǎn)生氨使pH升高，酚紅指示劑變紅色。變色區(qū)域越大，表明生成的氨越多，該菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。

（4）其他微生物一般以蛋白胨為氮源，不能在以尿素為氮源的培養(yǎng)基生存，故與全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)較少。

考點(diǎn)：本題考查微生物的培養(yǎng)和分離相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力。