Question

15．某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，培養(yǎng)基配方如表：

KH2pO4	Na2HP04	MgS04•7H20	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	l．Og	10．Og	l．Og	15．Og

（1）根鋸培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌不能 （能/不能），原因是培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源．
（2）要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數目就能大約推測出樣品中活菌數．
（3）接種前要對培養(yǎng)基進行滅菌．在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行．
（4）一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高，應當怎樣操作才可避免此種現象？對菌液進行梯度稀釋（加大稀釋倍數）．
（5）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法．對胡蘿卜進行粉碎、干燥時，要特別注意干燥的溫度和時間，以防止胡蘿卜焦糊．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基的概念是：在微生物學中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，由于分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無法生長．
2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落．

解答 解：（1）據題表分析，表中的配方不能篩選分離出尿素分解菌，原因是沒有使用選擇培養(yǎng)基，即培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出分解尿素的微生物．
（2）稀釋涂布平板法接種常用來進行微生物的計數，統(tǒng)計平板上的菌落數目可以推測出樣品中活菌數．
（3）接種前要對培養(yǎng)基進行滅菌．在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行．
（4）一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高，為避免此種現象，應對菌液進行梯度稀釋．
（5）胡蘿卜素是脂溶性物質，易溶于石油醚等脂溶性有機溶劑，可以使用萃取法提取胡蘿卜素；對胡蘿卜進行粉碎、干燥時，要特別注意干燥的溫度和時間，以防止胡蘿卜焦糊．
故答案為：
（1）不能        培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源    
（2）稀釋涂布平板          菌落數目    
（3）滅菌          無菌    
（4）菌液濃度過高          對菌液進行梯度稀釋（加大稀釋倍數）  
（5）萃取法       溫度

點評 本題以培養(yǎng)基成分的表格為載體，主要考查尿素分解菌的篩選與分離，意在強化學生對相關知識點的識記與理解．