Question

如圖為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育流程圖，選用的載體為pBR322質(zhì)粒（Amp^r表示氨芐青霉素杭性基因，Tet^r表示四環(huán)素抗性基因），該質(zhì)粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶的識別序列及切割位點見下表．請據(jù)圖回答：

（1）圖中①②表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的

 

．利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株，證明了香蕉組織細(xì)胞具有

 

．
（2）形成重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用的限制酶是

 

，對

 

進(jìn)行切割．
（3）一個質(zhì)粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同時切割后可得到

 

個DNA片段，

 

個黏性末端．
（4）若要篩選出已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，可將被感染的香蕉組織細(xì)胞置于含有

 

的培養(yǎng)基上培養(yǎng)進(jìn)行篩選，原因是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育流程圖，首先采用基因工程技術(shù)得到含有目的基因的受體細(xì)胞（獲取目的基因、構(gòu)建基因表達(dá)載體、采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測和表達(dá)）；其次采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將受體細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株，圖中①表示脫分化、②表示再分化過程．

解答： 解：（1）由以上分析可知：①②表示植物組織培養(yǎng)過程，其中①表示脫分化、②表示再分化；植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性．
（1）含有目的基因的外源DNA分子含有限制酶Sma I、Pst I和EcoR I的切割位點，但限制酶Sma I的切割位點位于目的基因上，所以應(yīng)選限制酶Pst I和EcoRI對目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割．
（3）質(zhì)粒會被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同時切割成三段，EcoR I、Pst l切割質(zhì)粒形成的是黏性末端，且每種酶切割質(zhì)粒后會形成兩個黏性末端，Sma I切割形成的是平末端，所以三種限制酶切割質(zhì)粒會形成四個黏性末端．
（4）用限制酶Pst I和EcoRI切割質(zhì)粒后會破壞四環(huán)素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此要篩選出已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，可將被感染的香蕉組織細(xì)胞置于含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)篩選．
故答案為：
（1）脫分化和再分化   全能性   
（2）PstI和EcoRI   含抗病基因的DNA和質(zhì)粒  
（3）3    4  
（4）四環(huán)素   四環(huán)素抗性基因（Tetr） 的結(jié)構(gòu)完整，但氨芐青霉素抗性基因（Ampr）的結(jié)構(gòu)被破壞

點評：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因香蕉形成的流程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的過程及原料，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．