Question

20．人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原．疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程如圖：

（1）過程①代表的是逆轉(zhuǎn)錄，過程③構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，啟動子和終止子是重新構(gòu)建的，其應(yīng)該能被受體細(xì)胞的限制酶和DNA連接酶所識別，以便于其轉(zhuǎn)錄．
（2）在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)之前，至少需要經(jīng)過兩次篩選，方法分別是用選擇性培養(yǎng)基篩選和用專一抗體檢測．
（3）以實(shí)驗(yàn)操作過程中用到的技術(shù)有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（至少寫三個(gè)）．
（4）在給小鼠皮下注射A蛋白時(shí)，要重復(fù)注射幾次的目的是通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的效應(yīng)B細(xì)胞數(shù)．
（5）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白來制備疫苗．對該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較，或用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體與分離出的病毒進(jìn)行特異性檢測．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過程；②是獲取目的基因（A基因）的過程；③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；④是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；⑤是從小鼠皮下獲取已經(jīng)免疫的B細(xì)胞的過程；⑥表示B細(xì)胞的增殖和分化過程；⑦是細(xì)胞融合過程；X為雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）由以上分可知①是逆轉(zhuǎn)錄．構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割含有A基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，再用DNA連接酶連接A基因和運(yùn)載體形成A基因重組載體．
（2）在單克隆抗體的制備過程中，至少需要經(jīng)過兩次篩選，一次是用用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；另一次是用專一抗體檢測方法篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（3）分析圖解可知，該過程中首先利用基因工程技術(shù)獲得A蛋白，然后利用動物細(xì)胞融合技術(shù)獲得重組細(xì)胞X，在利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對X細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)．
（4）由于在二次免疫過程可以增加小鼠體內(nèi)的效應(yīng)B細(xì)胞數(shù)，因此在給小鼠皮下注射A蛋白時(shí)，要重復(fù)注射幾次．
（5）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗．對該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較；或采用抗原-抗體雜交法，即用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄      限制酶和DNA連接酶
（2）選擇性培養(yǎng)基篩選     用專一抗體檢測
（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)   動物細(xì)胞融合技術(shù)   動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
（4）通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的效應(yīng)B細(xì)胞數(shù) 
（5）A蛋白     抗A蛋白的單克隆抗體

點(diǎn)評 本題結(jié)合疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程圖，考查基因工程、動物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體等知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，識記單克隆抗體的制備過程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱．