Question

1．材料Ⅰ：家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力．將人干擾素基因?qū)�入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥．材料Ⅱ：毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)．獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖．

請依材料所給出的信息分析回答下列問題：
（1）在基因工程操作程序中，基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心，為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間．
（2）采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細胞．該PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、干擾素基因特異的DNA引物對和熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（3）據(jù)材料Ⅱ，在過程②中，將成纖維細胞置于5%CO₂的氣體環(huán)境中，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．在過程③中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵（母）細胞．成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理．
（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示表示獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細胞培養(yǎng)過程，該過程需要采用胰蛋白酶處理組織塊以獲得單個細胞；③表示卵母細胞的采集和培養(yǎng)過程．
基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．其中基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，該載體是由目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止子組成的．

解答 解：（1）在基因工程操作程序中，基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心．基因表達載體的組成包括：目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子．來自cDNA文庫的干擾素基因片段是通過逆轉(zhuǎn)錄得到的，無啟動子和終止子等，將其插入在表達載體的啟動子和終止子之間才能構(gòu)成完整的基因并在受體細胞內(nèi)表達．
（2）PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、干擾素基因特異的DNA引物對和熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（3）在動物細胞培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于5%CO₂的氣體環(huán)境中，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．在卵母細胞的采集和培養(yǎng)過程中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵母細胞，成熟卵母細胞在核移植前需要進行去核處理．
（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎．
故答案為：
（1）基因表達載體的構(gòu)建   啟動子  終止子
（2）干擾素基因特異的DNA引物對     熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
（3）維持培養(yǎng)液的pH   促性腺激素   去核
（4）早期胚胎培養(yǎng)   胚胎分割

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．