Question

9．回答下列有關(guān)基因工程的問題．
利用大腸桿菌作為受體，可以將人生長激素基因?qū)�入其中，最后合成人生長激素（蛋白質(zhì)），從而大批量生產(chǎn)這種基因工程藥物．
（1）獲取人生長激素目的基因的方法有兩種．一是化學(xué)方法人工合成，二是先確定目的基因在細胞DNA分子上的位置，這叫基因定位，然后用限制酶從人體細胞內(nèi)分離．
基因工程中根據(jù)需要常對運載體質(zhì)粒進行適當?shù)母脑欤畃IJ702是一種常用質(zhì)粒（5.7kb，1kb=1000對堿基），限制酶SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分別只有一處識別序列，如圖1所示．

（2）以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換pIJ702上0.6kb（1kb=1000對堿基）的SacⅠ/SphⅠ片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8（6.7kb），由此判斷目的基因為1.6 kb．將目的基因和質(zhì)粒重新連接的酶是DNA連接酶．
圖2顯示含目的基因的DNA片段、限制酶MunⅠ和EcoRⅠ的識別序列（其中箭頭所指部位為限制酶的切割位點，四種質(zhì)粒的陰影部分表示標記基因）．
（3）據(jù)圖2分析，不適合作為目的基因載體的質(zhì)粒是C．
A．①③B．全都不適合C．②④D．①④
（4）下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因技術(shù)與環(huán)境安全的敘述錯誤的是B．
A．重組DNA的微生物在降解污染物的過程中可能會產(chǎn)生二次污染
B．種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量，對環(huán)境沒有任何負面影響
C．植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的基因可向其他植物擴散，影響生物的多樣性
D．轉(zhuǎn)基因生物所帶來的環(huán)境安全問題在今后有可能得到解決．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲取人生長激素目的基因的方法有兩種．一是化學(xué)方法人工合成，二是先確定目的基因在細胞DNA分子上的位置，這叫基因定位，然后用限制酶從人體細胞內(nèi)分離．
（2）pIJ702的長度為5.7kb，其中SacⅠ/SphⅠ片段的長度為0.6kb，該片段被目的基因置換后構(gòu)成的重組質(zhì)粒pZHZ8，其長度為6.7kb，由此判斷目的基因為6.7-（5.7-0.6）=1.6 kb．將目的基因和質(zhì)粒重新連接的酶是DNA連接酶．
（3）限制酶MunⅠ和EcoRⅠ的識別序列不同，但兩者切割產(chǎn)生的黏性末端相同，因此運載體應(yīng)該有限制酶MunⅠ或EcoRⅠ的識別序列，但該序列不應(yīng)該位于標記基因上．因此，不適合作為目的基因載體的質(zhì)粒是②④．
（4）A．重組DNA的微生物在降解污染物的過程中可能會產(chǎn)生二次污染，A正確；
B．種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量，減少環(huán)境污染，但轉(zhuǎn)基因植株可能會導(dǎo)致基因污染，進而影響生物多樣性，B錯誤；
C．植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的基因可向其他植物擴散，影響生物的多樣性，C正確；
D．轉(zhuǎn)基因生物所帶來的環(huán)境安全問題在今后有可能得到解決，D正確．
故選：B．
故答案為：
（1）化學(xué)方法人工合成        基因定位       限制酶
（2）1.6   DNA連接酶
（3）C
（4）B

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．