Question

如圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程．請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題：

（1）若限制酶l的識別序列和切點是，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是GATCC-那么在①過程中，應(yīng)用限制酶

 

切割質(zhì)粒，用限制酶

 

 切割抗蟲基因．①過程在體外進行．
（2）將通過②過程得到的大腸桿菌涂布在含有

 

的培養(yǎng)基，能夠生長說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導(dǎo)入，該培養(yǎng)基從功能方面屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）重組質(zhì)粒導(dǎo)人大腸桿菌的目的是

 

．
（4）經(jīng)篩選分析該植株細(xì)胞中含有一個攜帶抗蟲基因的DNA片段，因此可以把它看作是雜合子．理論上該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1代中，優(yōu)具有抗蟲特性且能穩(wěn)定遺傳的植株占總數(shù)的

 

．
（5）⑤過程所用技術(shù)稱為

 

_，從遺傳學(xué)角度來看，根本原因是根細(xì)胞具有

 

．

Answer 1

考點：基因工程的應(yīng)用,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：結(jié)合題意分析圖解：圖中目的基因的左右兩側(cè)分別有限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的識別序列；并且質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因上有限制酶Ⅰ的識別序列，氨芐青霉素抗性基因上具有限制酶Ⅱ的識別序列．并且兩種識別序列的末端是相同的．
圖中過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，②表示目的基因?qū)�入大腸桿菌，③表示目的基因?qū)�入土壤農(nóng)桿菌，④表示目的基因?qū)�入植物的根�?xì)胞，⑤表示通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得完成植株．

解答： 解：（1）質(zhì)粒中兩個標(biāo)記基因中均有限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-↓GATC-，若用該酶切，抗性基因均被破壞，因此用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒；目的基因可以用限制酶Ⅰ或兩種酶一起切割，由于兩種切割形成的末端序列相同，因此可以連接．
（2）用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒，破壞了質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因，因此標(biāo)記基因是四環(huán)素抗性基因，所以應(yīng)有含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上．
（3）由于大腸桿菌的繁殖快，周期短，因此將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌可以擴增目的基因．
（4）由于轉(zhuǎn)基因植株可以看成雜合子（Aa），因此Aa×Aa，后代具有抗蟲特性且能穩(wěn)定遺傳的植株（AA）占

1

4

．
（5）根據(jù)細(xì)胞的全能型（含有發(fā)育成完整個體的全部遺傳物質(zhì)），將以分化的根細(xì)胞培養(yǎng)成一棵植株，運用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
故答案為：
（1）ⅡⅠ（Ⅰ和Ⅱ） 
（2）四環(huán)素  
（3）大量復(fù)制目的基因 （抗蟲基因）
（4）1/4 
（5）植物組織培養(yǎng)  發(fā)育成完整個體的全部遺傳物質(zhì)

點評：本題具有一定的綜合性，難度適中，考查了基因表達(dá)載體的構(gòu)建、限制酶的作用特點、基因分離定律的應(yīng)用以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)等方面的知識，本題將多個知識點有機整合，既要求考生具有一定的識圖能力、分析能力、理解能力，又要求考生能識記相關(guān)基礎(chǔ)知識．