Question

【生物--選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題】
α₁-抗胰蛋白缺乏癥是一種在北美較為常見的單基因遺傳病，患者成年后會(huì)出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴(yán)重者甚至死亡．對(duì)于該致病患者�？刹捎米⑸淙甩�₁-抗胰蛋白酶來緩解癥狀．
（1）圖1表示獲取人α₁-抗胰蛋白酶基因的兩種方法，請(qǐng)回答下列問題：
①a過程是在

 

酶的作用下完成的；該酶的特點(diǎn)是

 

．
②利用c過程獲得的目的基因可以構(gòu)建

 

文庫，其為

 

（部分、基因組）文庫；
（2）利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)�入羊的受精卵，最終培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人α1-抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更易獲得這種酶，簡要過程如圖2．
①獲得目的基因后，常利用

 

技術(shù)在體外將其大量擴(kuò)增，該技術(shù)所用的酶是

 

；
②圖中目的基因?qū)�入受精卵的方法�?div id="nschjwd" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

，檢測目的基因是否成功表達(dá)的方法是

 

；
③基因表達(dá)載體d上的綠色熒光蛋白（GEP）基因作為

 

，便于目的基因的鑒別和選擇．d作為基因表達(dá)載體，除圖中的標(biāo)示部分外，還必須含有

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、分析圖示，a表示切割目的基因，b表示逆轉(zhuǎn)錄，c表示翻譯，d表示基因表達(dá)載體．
2、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定．
3、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．
4、基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因．標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．

解答： 解：（1）①a切割目的基因過程是在限制酶的作用下完成的；該酶的特點(diǎn)是識(shí)別特定的核苷酸序列，并且在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵切開．
    ②利用c逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的目的基因可以構(gòu)建cDN文庫，其為部分文庫．
（2）①獲得目的基因后，常利用PCR技術(shù)在體外將其大量擴(kuò)增，該技術(shù)所用的酶是Taq酶．
    ②圖中目的基因?qū)�入受精卵的方法是顯微注射技術(shù)，檢測目的基因是否成功表達(dá)的方法是抗原-抗體雜交技術(shù)．
    ③基因表達(dá)載體d上的綠色熒光蛋白（GEP）基因作為標(biāo)記基因，便于目的基因的鑒別和選擇．d作為基因表達(dá)載體，除圖中的標(biāo)示部分外，還必須含有啟動(dòng)子和終止子．
故答案為：
（1）①限制          識(shí)別特定的核苷酸序列，并且在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵切開
    ②cDNA              部分
（2）①PCR              Taq酶
    ②顯微注射技術(shù)     抗原-抗體雜交技術(shù)
    ③標(biāo)記基因          啟動(dòng)子和終止子

點(diǎn)評(píng)：本題意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問題的能力．分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)； ②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)； ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．