Question

科學(xué)家從某些能無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請(qǐng)回答以下相關(guān)問(wèn)題：

（1）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素是

 

．
（2）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)有兩次篩選，第1次篩選的目的是

 

，第2次篩選的目的是

 

．
（3）有人提出，可以直接通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體，其思路如右圖所示．

請(qǐng)回答：
①酶A是指

 

，酶B是指

 

②對(duì)已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的II進(jìn)行“檢測(cè)”的目的是

 

；
（4）也有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖示及文字表示該過(guò)程：

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過(guò)程,基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：傳統(tǒng)的單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．
基因工程的方法：由于效應(yīng)B細(xì)胞沒有細(xì)胞增殖的能力，因此選擇“無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG）”作為目的基因，“效應(yīng)B細(xì)胞”作為受體細(xì)胞，以期望獲得既能無(wú)限增殖、又能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞．
細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體：由于某些能無(wú)限增殖的細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG），因此在細(xì)胞核移植時(shí)，選擇效應(yīng)B細(xì)胞的細(xì)胞核和骨髓瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞核移植．

解答： 解：（1）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒．
（2）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)有兩次篩選，第1次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第2次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（3）在基因工程中，獲取目的基因和質(zhì)粒需要使用限制酶，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒；基因工程中，將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，還需要目的基因的檢測(cè)和鑒定，其目的是檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中成功表達(dá)．成功導(dǎo)入含有prG基因的細(xì)胞中，由于prG基因具有調(diào)控細(xì)胞無(wú)限增殖的功能，故Ⅲ中的細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（4）由于調(diào)控細(xì)胞無(wú)限增殖的prG基因位于細(xì)胞質(zhì)中，因此若要采用細(xì)胞核移植獲得單克隆抗體時(shí)，只能講漿細(xì)胞的細(xì)胞核移入到含有prG基因的細(xì)胞質(zhì)中，獲得重組細(xì)胞，最終獲得單克隆抗體．
故答案為：
（1）滅活的病毒
（2）篩選出雜交瘤細(xì)胞　     篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
（3）①限制性核酸內(nèi)切酶　   DNA連接酶
②檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否進(jìn)行了表達(dá)（或檢測(cè)受體細(xì)胞是否顯示出目的基因控制的性狀）
（4）見下圖（核質(zhì)分離、重組細(xì)胞、篩選、培養(yǎng)）

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞核移植和單克隆抗體的制備過(guò)程，比較綜合．答題時(shí)要注意題干中的信息，如利用細(xì)胞核移植獲得單克隆抗體時(shí)，只能將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的含有prG基因的細(xì)胞質(zhì)中，因?yàn)楦鶕?jù)題干可知，prG基因只存在于能無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中．