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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
基因敲除是80年代后半期應(yīng)用DNA同源重組原理發(fā)展起來的一門新技術(shù)。實(shí)際上是一套組合分子生物學(xué)技術(shù),包括基因重組、細(xì)胞分離培養(yǎng)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)等。80年代初,胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)分離和體外培養(yǎng)的成功奠定了基因敲除的技術(shù)基礎(chǔ)。1985年,首次證實(shí)的哺乳動物細(xì)胞中同源重組的存在奠定了基因敲除的理論基礎(chǔ)。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES細(xì)胞基因敲除的小鼠模型。此后的幾年中,基因敲除技術(shù)得到了進(jìn)一步的發(fā)展和完善。 “基因敲除細(xì)胞”的構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入新霉素抵抗基因等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能像“準(zhǔn)星”一樣, 將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選。
基本原理如下圖所示。
請根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)“從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增”需要利用_______________酶處理使其成為_______________,再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng);進(jìn)行培養(yǎng)時,培養(yǎng)液中除葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素外,還要加入_______________。 “基因敲除技術(shù)”以胚胎干細(xì)胞作為受體細(xì)胞是因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞具有 性。
(2)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)首先完成 ,在這
過程中所需要的工具酶是 。
(3)基因改造后的胚胎干細(xì)胞需要篩選,是一項(xiàng)的非常重要工作,原因是 。
(4)“基因基因敲除技術(shù)” 應(yīng)用到DNA同源重組原理涉及的變異類型實(shí)際上是 。
(5)如果通過上圖表示的過程,獲得一枚“敲除”一個靶基因的胚胎干細(xì)胞,并培養(yǎng)成一只克隆小鼠,獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因?為什么?
, 。
(6)上述資料中新霉素抵抗基因的作用最可能是 。
(7)科學(xué)家利用“基因敲除”技術(shù)進(jìn)行研究時,對照組是_______________。由于實(shí)驗(yàn)動物的基因組中_______________,所以通過實(shí)驗(yàn)動物與正常動物性狀的比較,能夠發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動物的_______________,從而確定被敲除基因的功能。
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科目:高中生物 來源:湖南省長郡中學(xué)2009—2010學(xué)年下學(xué)期高二學(xué)業(yè)水平模擬考試(理綜)生物部分 題型:綜合題
(15分)基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)!盎蚯贸(xì)胞”構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能像“準(zhǔn)星”一樣,將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選。
請根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)首先完成 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是 ;若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為 細(xì)胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因 。
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科目:高中生物 來源:湖南省2009—2010學(xué)年下學(xué)期高二學(xué)業(yè)水平模擬考試(理綜)生物部分 題型:綜合題
(15分)基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)!盎蚯贸(xì)胞”構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能像“準(zhǔn)星”一樣, 將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選。
請根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)首先完成 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是 ;若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為 細(xì)胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因 。
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科目:高中生物 來源: 題型:
基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)!盎蚯贸(xì)胞”構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能像“準(zhǔn)星”一樣, 將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選。
請根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)首先完成 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是 ;若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為 細(xì)胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因 。
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科目:高中生物 來源: 題型:
基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)!盎蚯贸(xì)胞”的構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選;驹砣缦聢D所示。
請根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)首先完成 ,在這過程中所需要的工具酶是 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是 。若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為 細(xì)胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)(2)中獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因? 。為什么? 。
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