Question

12．為研究雙氫青篙素（DHA）對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的作用，科研人員提出以下實(shí)驗(yàn)思路：
（1）取HCT116細(xì)胞用胰酶消化后，再用含血清的培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，分別接種于4塊培養(yǎng)板（一種多孔的細(xì)胞培養(yǎng)器具）的培養(yǎng)孔內(nèi)，置于CO₂培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)12h．
（2）取出培養(yǎng)板，吸棄培養(yǎng)孔內(nèi)上清液后向每孔中加入含有不同濃度DHA的培養(yǎng)液（濃度分別為0、125、250、500nmol/L），每個(gè)濃度加3個(gè)培養(yǎng)孔，置于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)．其它培養(yǎng)板也做相同處理．
（3）分別于加藥后12、24、48、72h后，各取一塊培養(yǎng)板，采用MTT檢測(cè)法測(cè)定各孔內(nèi)培養(yǎng)液的光吸收值（OD值），計(jì)算抑制率[抑制率=（1-$\frac{加藥組OD}{對(duì)照組OD}$）×100%]．
（說(shuō)明：MTT，即四唑氮藍(lán)，它能被活細(xì)胞線粒體中一種與檸檬酸循環(huán)有關(guān)的酶還原成不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶，而死細(xì)胞中此酶無(wú)活性，不能產(chǎn)生藍(lán)紫色結(jié)晶．故可經(jīng)相關(guān)處理后測(cè)OD值反映細(xì)胞存活率和抑制率．）
請(qǐng)回答：
（1）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖牵禾骄緿HA濃度及給藥時(shí)間對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制作用（探究DHA濃度及給藥時(shí)間對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制效應(yīng)）
（2）請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一張表格用于記錄實(shí)驗(yàn)時(shí)所測(cè)得的數(shù)據(jù)，便于抑制率的計(jì)算．
（3）實(shí)驗(yàn)中需要控制的無(wú)關(guān)變量有溫度、培養(yǎng)液pH、細(xì)胞數(shù)、孔內(nèi)添加培養(yǎng)液的量等（至少寫出兩個(gè)）．每個(gè)DHA濃度需加3個(gè)培養(yǎng)孔，是為了求平均值，減少實(shí)驗(yàn)誤差．
（4）若最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果以坐標(biāo)圖呈現(xiàn)，則縱坐標(biāo)應(yīng)標(biāo)識(shí)為抑制率．

Answer 1

分析 分析實(shí)驗(yàn)可知，實(shí)驗(yàn)的自變量為“不同濃度DHA的培養(yǎng)液”，實(shí)驗(yàn)的因變量為“各孔內(nèi)培養(yǎng)液的光吸收值”，并且OD值反映細(xì)胞存活率和抑制率，由此可以確定實(shí)驗(yàn)的目的為探究DHA濃度及給藥時(shí)間對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制效應(yīng)．

解答 解：（1）分析實(shí)驗(yàn)的自變量和因變量，并且培養(yǎng)液的光吸收值（OD值）就是抑制率，因此實(shí)驗(yàn)的目的為探究DHA濃度及給藥時(shí)間對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制作用．
（2）表格的橫列為加藥后12、24、48、72h的時(shí)間，縱列為濃度分別為0、125、250、500nmol/L，并且每個(gè)濃度有三個(gè)培養(yǎng)孔，同時(shí)增加一個(gè)平均值，表格如答案所示．
（3）實(shí)驗(yàn)中需要控制的無(wú)關(guān)變量有溫度、培養(yǎng)液pH、細(xì)胞數(shù)、孔內(nèi)添加培養(yǎng)液的量等（至少寫出兩個(gè)）．每個(gè)DHA濃度需加3個(gè)培養(yǎng)孔，是為了求平均值，減少實(shí)驗(yàn)誤差．
（4）若最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果以坐標(biāo)圖呈現(xiàn)，橫坐標(biāo)表示時(shí)間，縱坐標(biāo)應(yīng)標(biāo)識(shí)為抑制率，然后用四條不同的曲線表示四種不同的濃度．
故答案為：
（1）探究DHA濃度及給藥時(shí)間對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制作用（探究DHA濃度及給藥時(shí)間對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制效應(yīng)，其他合理答案也可）
（2）（表格共（4分），其中時(shí)間（1分），濃度（1分），OD值（1分），孔1-3及平均值1分）

（3）溫度、培養(yǎng)液pH、細(xì)胞數(shù)、孔內(nèi)添加培養(yǎng)液的量等     求平均值，減少實(shí)驗(yàn)誤差
（4）抑制率

點(diǎn)評(píng) 本題以雙氫青篙素為題材，考查了與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的實(shí)驗(yàn)探究，要求考生能夠通過(guò)實(shí)驗(yàn)的分析確定實(shí)驗(yàn)的自變量、因變量以及無(wú)關(guān)變量，從而確定實(shí)驗(yàn)探究目的，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)表格，具有一定的難度．