Question

12．為研究雙氫青篙素（DHA）對人結腸癌HCT116細胞的作用，科研人員提出以下實驗思路：
（1）取HCT116細胞用胰酶消化后，再用含血清的培養(yǎng)液制成細胞懸液，分別接種于4塊培養(yǎng)板（一種多孔的細胞培養(yǎng)器具）的培養(yǎng)孔內，置于CO₂培養(yǎng)箱內培養(yǎng)12h．
（2）取出培養(yǎng)板，吸棄培養(yǎng)孔內上清液后向每孔中加入含有不同濃度DHA的培養(yǎng)液（濃度分別為0、125、250、500nmol/L），每個濃度加3個培養(yǎng)孔，置于培養(yǎng)箱內培養(yǎng)．其它培養(yǎng)板也做相同處理．
（3）分別于加藥后12、24、48、72h后，各取一塊培養(yǎng)板，采用MTT檢測法測定各孔內培養(yǎng)液的光吸收值（OD值），計算抑制率[抑制率=（1-$\frac{加藥組OD}{對照組OD}$）×100%]．
（說明：MTT，即四唑氮藍，它能被活細胞線粒體中一種與檸檬酸循環(huán)有關的酶還原成不溶于水的藍紫色結晶，而死細胞中此酶無活性，不能產生藍紫色結晶．故可經相關處理后測OD值反映細胞存活率和抑制率．）
請回答：
（1）實驗目的是：探究DHA濃度及給藥時間對人結腸癌HCT116細胞的抑制作用（探究DHA濃度及給藥時間對人結腸癌HCT116細胞的抑制效應）
（2）請設計一張表格用于記錄實驗時所測得的數(shù)據(jù)，便于抑制率的計算．
（3）實驗中需要控制的無關變量有溫度、培養(yǎng)液pH、細胞數(shù)、孔內添加培養(yǎng)液的量等（至少寫出兩個）．每個DHA濃度需加3個培養(yǎng)孔，是為了求平均值，減少實驗誤差．
（4）若最終的實驗結果以坐標圖呈現(xiàn)，則縱坐標應標識為抑制率．

Answer 1

分析 分析實驗可知，實驗的自變量為“不同濃度DHA的培養(yǎng)液”，實驗的因變量為“各孔內培養(yǎng)液的光吸收值”，并且OD值反映細胞存活率和抑制率，由此可以確定實驗的目的為探究DHA濃度及給藥時間對人結腸癌HCT116細胞的抑制效應．

解答 解：（1）分析實驗的自變量和因變量，并且培養(yǎng)液的光吸收值（OD值）就是抑制率，因此實驗的目的為探究DHA濃度及給藥時間對人結腸癌HCT116細胞的抑制作用．
（2）表格的橫列為加藥后12、24、48、72h的時間，縱列為濃度分別為0、125、250、500nmol/L，并且每個濃度有三個培養(yǎng)孔，同時增加一個平均值，表格如答案所示．
（3）實驗中需要控制的無關變量有溫度、培養(yǎng)液pH、細胞數(shù)、孔內添加培養(yǎng)液的量等（至少寫出兩個）．每個DHA濃度需加3個培養(yǎng)孔，是為了求平均值，減少實驗誤差．
（4）若最終的實驗結果以坐標圖呈現(xiàn)，橫坐標表示時間，縱坐標應標識為抑制率，然后用四條不同的曲線表示四種不同的濃度．
故答案為：
（1）探究DHA濃度及給藥時間對人結腸癌HCT116細胞的抑制作用（探究DHA濃度及給藥時間對人結腸癌HCT116細胞的抑制效應，其他合理答案也可）
（2）（表格共（4分），其中時間（1分），濃度（1分），OD值（1分），孔1-3及平均值1分）

（3）溫度、培養(yǎng)液pH、細胞數(shù)、孔內添加培養(yǎng)液的量等     求平均值，減少實驗誤差
（4）抑制率

點評 本題以雙氫青篙素為題材，考查了與動物細胞培養(yǎng)有關的實驗探究，要求考生能夠通過實驗的分析確定實驗的自變量、因變量以及無關變量，從而確定實驗探究目的，設計實驗表格，具有一定的難度．