Question

15．通過農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)入法培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物的過程如圖（圖中①〜④表示相應操作過程）．請回答：

（1）如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一個包括外源基因來源生物中所有基因的基因文庫來獲取外源基因．圖中②過程涉及的工具酶是DNA連接酶．
（2）將外源遺傳物質(zhì)與受體植物細胞（包括原生質(zhì)體受體）遺傳物質(zhì)重新組合，除了轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，還有
細胞融合或顯微注射等方法，這些方法解決了傳統(tǒng)育種方法存在的遠緣親本難以雜交（或生殖隔離）的缺陷．植物原生質(zhì)體的獲取可以在較高滲透壓環(huán)境下，用纖維素酶和果膠酶處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細胞的細胞壁．
（3）如果構(gòu)建重組細胞的目的是為了獲取重要的次生代謝產(chǎn)物（如某些中藥），可以通過大量培養(yǎng)特定細胞系來達成目的．
（4）如果農(nóng)桿菌侵染對象為某植物葉片，將被侵染的葉片除菌后進行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因植物．下列敘述中TH確的是D．
A．愈傷組織在合適條件下經(jīng)脫分化形成再生植株
B．再生的芽在細胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根
C．葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上經(jīng)再分化形成愈傷組織
D．愈傷組織在細胞分裂素和生長素配比較髙的培養(yǎng)基上形成芽．

Answer 1

分析 分析題圖：①表示從農(nóng)桿菌中獲取Ti質(zhì)粒，②表示基因表達載體的構(gòu)建，③表示將目的基因?qū)�入植物細胞，④表示植物組織培養(yǎng)．

解答 解：（1）獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取；②利用PCR技術(shù)擴增；③人工合成（化學合成）．其中采用PCR技術(shù)擴增和人工合成法都適用于目的基因序列已知的情況下，如果外源基因的核苷酸序列是未知的，則應該從基因文庫中獲取，即可以建立一個包括外源基因來源生物中所有基因的基因文庫來獲取外源基因．圖中②表示目的基因與運載體連接形成重組質(zhì)粒，該過程涉及的工具酶是DNA連接酶．
（2）將外源遺傳物質(zhì)與受體植物細胞（包括原生質(zhì)體受體）遺傳物質(zhì)重新組合，除了轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，還有細胞融合或顯微注射等方法，這些方法解決了傳統(tǒng)育種方法存在的遠緣親本難以雜交（或生殖隔離）的缺陷．植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理去除植物細胞壁應該用纖維素酶和果膠酶．
（3）如果構(gòu)建重組細胞的目的是為了獲取重要的次生代謝產(chǎn)物（如某些中藥），可以通過大量培養(yǎng)特定細胞系來達成目的．
（4）A．愈傷組織在合適條件下經(jīng)再分化形成再生植株，A錯誤；
B．再生的芽在細胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上發(fā)芽，在生長素含量較高的培養(yǎng)基上生根，B錯誤；
C．葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上經(jīng)脫分化形成愈傷組織，C錯誤；
D．愈傷組織在細胞分裂素和生長素配比較髙的培養(yǎng)基上形成芽，D正確．
故選：D．
故答案為：
（1）基因文庫  DNA連接酶
（2）細胞融合或顯微注射      遠緣親本難以雜交（或生殖隔離）    纖維素酶和果膠
（3）細胞系   
（4）D

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記植物細胞工程的相關(guān)技術(shù)及其應用，能正確分析題圖，再結(jié)合所學的知識準確答題．