Question

【題目】Ⅰ狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患的烈性傳染病，制備鼠源性抗狂犬病病毒單克隆抗體是檢測(cè)狂犬病病毒、治療狂犬病的有效措施之一。請(qǐng)回答下列問題：

（1）用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠，一段時(shí)間后，若小鼠血清中檢出_________的抗體，則說明小鼠產(chǎn)生了免疫反應(yīng)。再?gòu)男∈笃⒓?xì)胞中獲取______，然后將其與骨髓瘤細(xì)胞融合。

（2）在細(xì)胞融合完成后，篩選出雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_____

（3）得到的單克隆抗體能準(zhǔn)確地識(shí)別出RRIG蛋白，原因是單克隆抗體具有 ________的特性。

ⅡDNA序列D能在基因A表達(dá)的轉(zhuǎn)移酶作用下，從序列D所在染色體的某個(gè)位置轉(zhuǎn)移到其他位置，或隨機(jī)轉(zhuǎn)移到其他染色體上。科研人員利用這一原理來(lái)構(gòu)建穩(wěn)定遺傳的大豆突變體庫(kù)。

（1）科研人員分別將序列D和基因A作為____________，插入含卡那霉素抗性基因的T-DNA上，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物，篩選得到轉(zhuǎn)D植株和轉(zhuǎn)A植株。

（2）將得到的轉(zhuǎn)D植株或轉(zhuǎn)A植株自交，若某植株所結(jié)種子中具有卡那霉素抗性的占_________，則判斷該植株為T-DNA單拷貝插入。繼續(xù)種植具有卡那霉素抗性的種子，長(zhǎng)成植株后進(jìn)行自交，若某植株所結(jié)種子_____________________________，可獲得純合的轉(zhuǎn)D植株或轉(zhuǎn)A植株。

（3）科研人員將純合的轉(zhuǎn)D植株與轉(zhuǎn)A植株雜交，并根據(jù)轉(zhuǎn)入兩種植株中的DNA序列的差異，用PCR方法確定雜交是否成功，結(jié)果如下圖所示：

據(jù)圖可知，F(xiàn)1植株編號(hào)為________________________的雜交組是雜交成功的。

Answer 1

【答案】抗RRIG蛋白 B淋巴細(xì)胞 無(wú)限增殖且能產(chǎn)生專一性抗體 特異性強(qiáng)，靈敏度高 目的基因 3/4 全部具有卡那霉素抗性 3～5、7～9、11

【解析】

據(jù)題文描述可知：本題考查學(xué)生對(duì)生產(chǎn)單克隆抗體、基因工程的基本操作程序、基因的分離定律等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力，以及獲取信息、分析問題的能力。

Ⅰ(1) 狂犬病病毒的RRIG蛋白屬于抗原，在抗原的刺激下，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體�？梢姡�用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠，一段時(shí)間后，若小鼠血清中檢出抗RRIG蛋白的抗體，則說明小鼠產(chǎn)生了免疫反應(yīng)。之后，將從免疫小鼠脾細(xì)胞中獲取的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。

(2) 雜交瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖且能產(chǎn)生專一性抗體的特點(diǎn)。

(3) 由于制備的鼠源性抗狂犬病病毒的單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特性，因此能準(zhǔn)確地識(shí)別出RRIG蛋白。

Ⅱ(1)依題意可知：可分別將序列D和基因A作為目的基因，插入含卡那霉素抗性基因的T-DNA上，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物，篩選得到轉(zhuǎn)D植株和轉(zhuǎn)A植株。

(2) T-DNA上含卡那霉素抗性基因，若將T-DNA單拷貝插入植株的染色體上，則該轉(zhuǎn)D植株或轉(zhuǎn)A植株相當(dāng)于與卡那霉素抗性基因有關(guān)的雜合子，其自交植株所結(jié)種子中具有卡那霉素抗性的占3/4，其中純合子與雜合子之比約為1∶2，純合子自交后代不發(fā)生性狀分離�？梢姡�繼續(xù)種植具有卡那霉素抗性的種子，長(zhǎng)成植株后進(jìn)行自交，若某植株所結(jié)種子全部具有卡那霉素抗性，則可獲得純合的轉(zhuǎn)D植株或轉(zhuǎn)A植株。

(3) 將純合的轉(zhuǎn)D植株與轉(zhuǎn)A植株雜交，F(xiàn)1植株中應(yīng)同時(shí)具有序列D和基因A，據(jù)此分析圖示可知：F1植株中編號(hào)為3～5、7～9、11的植株同時(shí)具有序列D和基因A，說明這些植株的雜交組是雜交成功的。